39. 【生物—生物技术实践】（本题共15分）

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图22 回答：

    图22

（1）（每空2分）提取目的基因

  ①若已获取PG的mRNA，可通过                 获取PG基因。

②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有         结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图23-甲所示，请在图23-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是                                。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有           的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入                       。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞                   现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与                         互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄        ，则可确定转基因番茄成功。

（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用      方法使子代保持转基因的优良性状。（2分）

据图示回答下列问题（22分，每空2分）

（1）判断以上甲、乙两图，其中属于原核细胞的是     ，属于真核细胞的是         。判断依据为                                      。
（2）甲、乙两细胞在结构上相似之处为                                       ，由此可以看出原核细胞和真核细胞具有     性。不同之处有                                      。由此可见，两种细胞存在          性。
（3）在乙图的细胞中，DNA主要分布在_________中。在甲图中的细胞中，DNA主要分布在                                   。
（4）常见的甲种细胞组成的生物有                                     等，常见的乙种细胞组成的生物有                                     等。

（每空2分，共22分）右图为植物细胞亚显微结构模式图，请据图回答（示例：［1］细胞膜，序号与名称全对才给分）：

（1）进行光合作用的场所是［    ］          ；能使活细胞中的结构10呈现蓝绿色的染液是             。

（2）图中具有双层膜的细胞结构有_______________（填图中序号）。

（3）细胞内表面积最大的膜结构是[    ]            ；图中6是          ，它与                           有关。

（4）该细胞中有，而动物细胞没有的细胞器是［   ］          和［   ］         。除了图中所示结构外，某些低等植物细胞还具有的结构是______________，该结构与                有关。

（5）假设此细胞可以合成分泌蛋白，则从分泌蛋白的合成至分泌到细胞外经过细胞器或细胞结构的途径依次为_______________（填图中序号）。

(22分，每空2分)I．多数真核生物基因中编码蛋白质的序列被一些不编码蛋白质的序列隔开，每一个不编码蛋白质的序列称为一个内含子。这类基因经转录、加工形成的mRNA中只含有编码蛋白质的序列。某同学为检测某基因中是否存在内含子，进行了下面的实验：
步骤①：获取该基因的双链DNA片段及其mRNA；
步骤②：加热DNA双链使之成为单链，并与步骤①所获得的mRNA按照碱基配对原则形成双链分子；
步骤③：制片、染色、电镜观察，可观察到图中结果。

请回答：
图中凸环形成的原因是____________________，说明该基因有     个内含子。
若蓝藻基因编码区与该生物基因编码区长度一样，则其编码的氨基酸的数目比该生物基因编码的氨基酸的数目______ 。（少，相等，多）
II．番茄果实成熟过程中，某种酶（PG）开始合成并显著增加，促使果实变红变软。但不利于长途运输和长期保鲜。科学家利用反义RNA技术（见图解），可有效解决此问题。该技术的核心是，从番茄体细胞中获得指导PG合成的信使RNA，继而以该信使RNA为模板人工合成反义基因并将之导入离体番茄体细胞，经组织培养获得完整植株。新植株在果实发育过程中，反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA（靶mRNA）互补形成双链RNA，阻止靶mRNA进一步翻译形成PG，从而达到抑制果实成熟的目的。请结合图解回答：

反义基因像一般基因一样是一段双链的DNA分子，合成该分子的第一条链时，使用的模板是细胞质中的信使RNA，原料是四种______________，所用的酶是______________。
开始合成的反义基因第一条链是与模板RNA连在一起的杂交双链，通过加热去除RNA，然后再以反义基因第一条链为模板合成第二条链，这样一个完整的反义基因被合成。若要以完整双链反义基因克隆成百上千的反义基因，所用复制方式为__________________。
将人工合成的反义基因导入番茄叶肉细胞的运输工具是________________，该目的基因与运输工具相结合需要使用的酶有___________________________________，。假如反义基因最终的导入位置是在受体细胞的细胞质中，要想通过杂交使得这个基因传下去，则应在杂交中选择转基因植物做_____________________（选“母本”或“父本”）
离体番茄体细胞，组织培养获得完整植株。其培养基成分与动物细胞培养液相比较特有的成分是_____________ 。
20世纪90年代由美国科学家首先提出了“人类基因组计划”，也积极开展了其他生物基因组的研究。按照此计划，需要测定的马的单倍体基因组为_____________条染色体（马为二倍体，其染色体条数为64）。

（每空2分，共22分。）下图为物质出入细胞的3种方式示意图，请据图回答([   ]内填序号)：

(1)物质利用载体蛋白出入细胞的运输方式是图[     ]和[    ]。
(2) 可能代表氧气转运方式的是图中[  ]         ；碘进入人体甲状腺滤泡上皮细胞的过程是图中[  ]        ；葡萄糖进入红细胞的过程是图中[  ]         。
(3)图中①、②两种运输方式合称为               。
(4)与细胞表面识别有密切关系的结构是              。
（5）从细胞膜的功能特性看，它是             膜。