（08广州市综合测试）(生物技术实践专题，10分)

饮用水的质量问题是2007年最引人关注的问题之一。大肠菌群是一群以大肠埃希氏菌为主的需氧及兼性厌氧细菌。大肠菌群指数(c。U―index)指1升水中含有的大肠菌群数。大肠菌群指数常用于饮用水、食品、饮料等的卫生检测。检测中规定生活饮用水的水质标准为1升水中大肠菌群不得超过3个，即大肠菌群指数不得大于3。

某人在测定自来水中的大肠杆菌群时，先将5升自来水水样浓缩至5毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到4个培养皿中培养，4次培养后计数的菌落数分别是32、38、35、8。请回答下列问题：

（1）根据上述结果计算，被检水样大肠菌群指数为        ，水样    (是、否)达标。

（2）下表是某公司研发的一种测定大肠菌群的配方(g／L)。

从成分看，该培养基的类型是           培养基，可以推测培养基配方中的营养物质应包括碳源、氮源和            。

（3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和稀释平板涂布法，但无论哪种接种方法，其主要目的都是防止杂菌污染，请指出灭菌和消毒这两种方法的差异。

                                                                         。

（4）利用培养基技术不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。请简要说明这两项技术应用设计思路的相同点以及区别。

相同点：                                                         。

不同点：                                                         。

（5）现有一种珍稀兰花，请简述如何通过组织培养获得脱毒苗。

                                                                 。

（09惠州市三调）（生物技术实践专题，10分）乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：

（1）玉米秸杆经预处理后，应该选用          酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。写出发酵产生酒精的反应式          。

（2）从以下哪些微生物中可以提取上述预处理所需的酶

A．酿制果醋的醋酸菌               B．生长在腐术上的霉菌

C．制作酸奶的乳酸菌               D．生产味精的谷氨酸棒状杆菌

（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为          （按功能分），培养基中的碳源为          。

（4）从生物体提取出的酶首先要检测          ，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用          技术。

（5）发酵阶段需要的菌种是          ，在产生酒精时要控制的必要条件是          。

（选修1《生物技术实践》，10分）传统发酵技术的应用和酶的应用与我们的生活息息相关。

（1）如下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图回答：

①制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是__________的含量低。

②制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约为4：1，盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是____________。

③泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，试分析可能的原因：_______________________。

④测定亚硝酸盐含量的方法是___________________。

（2）果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁和胞间层。在果汁生产中应用果胶酶可以提高出汁率和澄清度。请你帮助完成以下有关果胶酶和果汁生产的实验课题。

实验用具和材料：磨浆机、烧杯、试管、量筒、刀片、玻璃棒、漏斗、纱布等；苹果、

质量分数为2％的果胶酶溶液、蒸馏水等。

【课题】  验证果胶酶在果汁生产中的作用

实验方法及步骤：

①将苹果洗净去皮，用磨浆机制成苹果泥，加入适量蒸馏水备用。

②取两个100ml的洁净烧杯，编号1、2，按相应程序进行操作。

请把上表中A、B空格处未填写的内容填上。A            , B             。

③取两个烧杯，同时进行过滤。一定时间后，观察（或比较）                    _____，并记录结果。

 （《生物技术实践》，15分）

    为了实现燃料供应来源多样化，发展长期替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等已经列入我国未来10年的发展计划。

    广东省是我国甘蔗主产区之一。甘蔗是一种高光效的C₃植物，单位面积产量很高，种植面积日益扩大，  目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗     榨汁（蔗糖）     酵母发酵     蒸馏     成品（燃料酒精）。

    请根据上述材料，回答下列问题：

    （1）简述甘蔗大规模快速繁殖技术的过程。

（2）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

    步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

    步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意       和           ，加琼脂后灭菌，制成固体平板。

    步骤3：将紫外照射后的菌液稀释涂布平板。

    步骤4：根据           筛选出突变菌。

    （3）上述步骤2、3和4的依据分别是         。

（4）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵还有哪些可行方法?（列举两种）

（5）甘蔗榨汁以后还有大量的蔗渣废弃物，主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用，原因是其                  。请提出解决该问题的方法。（列举两种方法）

（6）突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物和DNA聚合酶的作用分别是什么?

）【生物一生物技术实践】下表为某微生物培养基的配方，请回答：

（l）该培养基中的碳源是         ，依用途划分，该培养基属于         培养基。不论何种培养基，在各成分溶化分装前，要进行的是           。

（2）若用该培养基培养尿素分解菌，应除去的物质是       ，加入的物质是        。

（3）为检测尿素分解菌的存在与否，还应加入      ，将呈     反应。

（4）细菌种群进化过程中，起主要作用的变异来源是               。