（生物技术实践，10分）莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下面程序选育能 降解莠去津的细菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。据图回答：

(1)由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为 ____ ，目的是________________________。

(2)在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行 ____ ，将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和________法，从图中看本实验采用的是 ________ （填“前者”或“后者”）。一段时间后，培养基出现无透明带菌落和有透明带菌落两种菌落，我们筛选的目的菌是      菌落中的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要来源于______________________。

(3)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基，要如何设置对照组？________________。

(4)此实验中，某同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。该同学的实验结果产生的原因可能是________________________________。

（生物技术实践，10分）下面是将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图，结合图解回答相关 问题：

(1)选取四倍体兰花叶片时，要选择 __________ 的叶片；外植体消毒后才可以 __________ ，且此操作必须在酒精灯旁进行。

(2)植物激素中 __________和___________是启动细胞分裂的关键性激素；与①阶段相比，②阶段 __________ （填激素名称）的作用呈现加强的趋势。

(3)现代药理研究表明，兰花的芳香成分--芳香油使人心旷神怡，清除宿气，解郁消闷，提神醒脑。实验室提取植物芳香油的方法有蒸馏、____和__________ 等，根据蒸馏过程中原料放置的位置，可以将水蒸气蒸馏法划分为 __________、__________ 的__________。

（09韶关市调研）(生物技术实践，10分)

生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶解→酵母发酵→蒸馏→成品。

（1）纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。

①最好选择怎样的环境采集土样？_________________________________。

②以下是一种培养基配方：纤维素粉5 g、NaN0₃ 1g、Na₂HP0₄?7H₂0 1．2g、KH₂P0₄0．9 g、MgS0₄．7H₂O 0．5g、KCl 0．5g、酵母膏0．5 g、水解酪素O．5g(蒸馏水定容到1000mL)。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是 ____________________________。

③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入______________染液，将筛选获得的菌液稀释后用______________方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生______________的菌落作为菌种进行扩大培养。

④纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量如何呢?请设计实验进行检测。____________________________________。

（2）进行工业化酶解时，为了使纤维素酶能反复使用，可以采用______________技术。

（3）乙醇是酵母菌的发酵产物。发酵时酵母菌直接利用的物质是______________。

（4）发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性，从而影响进一步的发酵。科学家利用基因工程方法创造出一种对乙醇浓度有高耐受力的酵母菌新菌种，该过程需采用PCR技术扩增目的基因。与体内DNA复制相比，PCR反应体系需加入哪两种特别的物质？_______________________________________________________。

（09深圳市调研）（生物技术实践，10分）多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。

（1）DNA的两条链是反向平行的，通常将____________的末端称为5’端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的_________开始延伸DNA链。

（2）PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到__________________，它的发现和应用解决了上述问题；要将Taq细菌从其它普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫___________________________。

（3）PCR的每次循环可以分为__________________三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有_________个这样的DNA片段。

（4）请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。

（5）简述PCR技术的主要应用。

（09广州市一模）（生物技术实践， 10 分）下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问题：

（1）选用的材料合适与否是成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用____________期的花粉可提高成功率。选择花粉时，一般要通过____________来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是____________。

（2）上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中____________。

（3）胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度____________的薄壁细胞，胚状体与____________发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根。

（4）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌。①培养基，②培养皿，③接种环，④花蕾， ⑤实验操作者的双手，⑥三角锥形瓶。 ________________________（填编号）需要灭菌，________________________（填编号）需要消毒。

（5）试管苗移栽到土壤前，通常要进行壮苗处理，应如何壮苗？