30.     （18分）

科学工作者利用基因工程研制出两种丙肝病毒疫苗，为检测两种疫苗的免疫效果，以小鼠为实验材料进行实验，实验处理及结果如下表：

组别	实验处理	淋巴细胞 增殖	产生某种 淋巴因子	效应T细胞 杀伤力	产生特异性抗体
1	接种生理盐水	－	－	－	－
2	接种未重组空白载体	＋	＋	＋	－
3	接种重组DNA疫苗	＋＋	＋＋	＋＋	＋
4	接种未重组细菌	＋	＋	＋	－
5	接种重组细菌疫苗	＋＋	＋＋＋	＋＋＋	＋＋

注：“－”表示免疫应答效果不显著，“＋”数目表示免疫应答效果的显著程度。

⑴ 制备疫苗的过程中首先要形成重组DNA分子，其过程是以分枝杆菌的________作为载体，目的基因来源于________（生物），用________限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体，形成相同的粘性末端，用________酶进行连接。再将该重组DNA分子直接导入分枝杆菌，可制成重组细菌疫苗。或者对该重组DNA分子进行修饰使其能在真核细胞内表达，可制成DNA疫苗。

⑵ 重组细菌进入小鼠的巨噬细胞内，利用________细胞的表达系统合成抗原蛋白。

⑶ 设置第2组和第4组作为对照，其目的是________。检测结果显示，未重组细菌和未重组空白载体________（能/不能）刺激机体产生体液免疫。

⑷ 每组实验需要接种3次，利用再次免疫具有________的特点，使实验结果更加显著。效应T细胞可来源于________。

⑸ 实验结论：

   ①___________________________________________________；

   ②___________________________________________________。

白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入酵母细胞中,使其分泌出有活性的人白细胞介素。

   

    (1)在体液免疫过程中,白细胞介素是由　　　　细胞分泌的,可作用于受到抗原刺激的B细胞,使B细胞增殖、分化,形成　　　　细胞。 

    (2)目的基因获取:从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞,于37 ℃培养48 h后提取细胞总RNA,生成cDNA。根据已知目的基因的核苷酸序列合成引物,通过PCR扩增获取目的基因,此时需要加入的反应物与生成cDNA时所加反应物不同的是 

    (3)重组载体的构建:用两种限制酶EcoR 1和EcoR 52处理载体和目的基因后用　　　　　酶处理,形成重组载体。该载体与细胞膜载体的化学本质分别是　　　　和　　　　。 

   

   

30.     （18分）

科学工作者利用基因工程研制出两种丙肝病毒疫苗，为检测两种疫苗的免疫效果，以小鼠为实验材料进行实验，实验处理及结果如下表：

组别	实验处理	淋巴细胞 增殖	产生某种 淋巴因子	效应T细胞 杀伤力	产生特异性抗体
1	接种生理盐水	－	－	－	－
2	接种未重组空白载体	＋	＋	＋	－
3	接种重组DNA疫苗	＋＋	＋＋	＋＋	＋
4	接种未重组细菌	＋	＋	＋	－
5	接种重组细菌疫苗	＋＋	＋＋＋	＋＋＋	＋＋

注：“－”表示免疫应答效果不显著，“＋”数目表示免疫应答效果的显著程度。

⑴ 制备疫苗的过程中首先要形成重组DNA分子，其过程是以分枝杆菌的________作为载体，目的基因来源于________（生物），用________限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体，形成相同的粘性末端，用________酶进行连接。再将该重组DNA分子直接导入分枝杆菌，可制成重组细菌疫苗。或者对该重组DNA分子进行修饰使其能在真核细胞内表达，可制成DNA疫苗。

⑵ 重组细菌进入小鼠的巨噬细胞内，利用________细胞的表达系统合成抗原蛋白。

⑶ 设置第2组和第4组作为对照，其目的是________。检测结果显示，未重组细菌和未重组空白载体________（能/不能）刺激机体产生体液免疫。

⑷ 每组实验需要接种3次，利用再次免疫具有________的特点，使实验结果更加显著。效应T细胞可来源于________。

⑸ 实验结论：

   ①___________________________________________________；

   ②___________________________________________________。

某同学为验证“体液免疫需要T淋巴细胞和B淋巴细胞的共同参与”，利用给定的材料设计了如下实验：

实验材料：未受感染的体重相同的小白鼠若干只,X射线照射仪，新鲜的T淋巴细胞和B淋巴细胞，毒性极低的霍乱弧菌疫苗以及其他必要的工具。

实验原理：T淋巴细胞和B淋巴细胞的有无，能影响抗体的产生，通过测定血清中抗体数量的多少可判断体液免疫的强弱。

方法步骤：

第一步：将小白鼠分为1、2、3三组，分别摘除胸腺，并用大量的X射线照射。

第二步：向第1组小鼠体内注射T淋巴细胞，向第2组小鼠体内注射B淋巴细胞，向第3组小鼠体内注射T淋巴细胞和B淋巴细胞。

第三步：分别在上述三组小鼠体内接种霍乱弧菌疫苗。

第四步：饲养一段时间后，分别测定各组小鼠体内血清中抗体的数量。

请回答下列问题：

（1）上述实验步骤中存在不严谨之处，请指出并更正。

(2)结果预期及结论：

（13分）请根据所学知识，回答下列与生命活动调节相关的问题：

Ⅰ．（1）人体进行正常生命活动的必要条件是                     。

（2）性激素与甲状腺激素的分泌调节方式相似，由此推测下丘脑通过分泌                 激素间接调节性腺的活动。

（3）已知卵巢分泌的雌性激素能促进子宫发育。研究人员为探究激素影响卵巢和子宫的发育，用一批幼鼠做了如下实验：请回答：

① 分组时应将______________雌幼鼠随机分成______组，每组10只。

② 表中第2组A的处理方法是              。

③ 第3组实验结果产生的原因是                                           。

Ⅱ．下图甲是a-银环蛇毒引发机体免疫效应的部分示意图，图乙是a-银环蛇毒影响兴奋传递的部分示意图。请分析回答：

（1）当兴奋传导到图乙⑥处时，其膜内的电位是_________。由图乙可知，a-银环蛇毒影响兴奋传递的原因是_________________________________________________。

（2）请写出a-银环蛇毒侵入人体引发体液免疫被清除的过程。