（每空2分，共11分）请分析回答基因工程的相关问题：

（1）基因工程的理论基础是         法则，可用公式（图解）表示为        

                              。?

（2）利用PCR技术（全称：                    ）可以扩增目的基因，即在试管中进行DNA的人工复制获得大量DNA克隆分子。某样品DNA中共含有3000个碱基对，碱基数量满足：（A+T）：（G+C）=1 ：2，现计划通过PCR得到100个与样品相同的DNA，至少需要向试管中加入          个腺嘌呤脱氧核苷酸。

（3）为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物 （单位bp）	第二步水解	产物 （单位bp）
	A酶切割	1900	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1700  200
		1500		800  700
		1600		1100 500

由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为         个和         个。

（每空2分，共11分）请分析回答基因工程的相关问题：

（1）（3分）基因工程的理论基础是         法则，可用公式（图解）表示为        

                              。?

（2）（4分）利用PCR技术（全称：                    ）可以扩增目的基因，即在试管中进行DNA的人工复制获得大量DNA克隆分子。某样品DNA中共含有3000个碱基对，碱基数量满足：（A+T）：（G+C）=1 ：2，现计划通过PCR得到100个与样品相同的DNA，至少需要向试管中加入          个腺嘌呤脱氧核苷酸。

（3）（4分）为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物 （单位bp）	第二步水解	产物 （单位bp）
A酶切割	1900	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1700  200
1500	800  700
1600	1100 500

 

由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为         个和         个。

 

（8分）为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

（1）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为         个和
       个。
（2）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（3）已知BarnH I与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BarnH工和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后           和            序列明显增多。

为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物 （单位bp）	第二步水解	产物 （单位bp）
A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900   200
1400	800    600
1000	1000
500	500
B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900   600
1300	800    500
1200	1000   200
经A酶和B酶同时切割	1900    1000    800    600    500    200

（1）该实验设计主要体现了__________________原则。

（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和____个。

（3）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后        和          序列明显增多。

 

 

 

 

 

 

（12分）为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）	第一步水解	产物 （单位bp）	第二步水解	产物 （单位bp）
A酶切割	2100	将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割	1900   200
1400	800    600
1000	1000
500	500
B酶切割	2500	将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割	1900   600
1300	800    500
1200	1000   200
经A酶和B酶同时切割	1900    1000    800    600    500    200

（1）该实验设计主要体现了__________________原则。

（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。

（3）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和___________序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化_________键的形成。