37.(现代生物科技专题.l5分) 2007年诺贝尔生理学或医学奖授予在“基因靶向 技术方面作出突出贡献的三位科学家.“基因靶向 技术.指的是应用DNA同源重组原理.通过一定的载体.用设计好的目的基因替代靶基因.从而达到使靶基因功能丧失的目的.借助这一技术.科学家可以用小鼠进行实验.使其体内的某项特定基因丧失功能.以帮助人们找到治疗疾病的有效方法.下面是该实验的基本过程.请回答有关问题. (1)获得胚胎干细胞.实验一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞.这是因为 .举出一例获取Es细胞的常用方法: . (2)获取目的基因. ①目的基因是靶基因的同源片段.经过修饰使靶基因的功能改变或丧失.就可获得目的基因.如果要获得活性降低了的x酶蛋白的目的基因.可以采用蛋白质工程技术.请简述其过程. ②为了提高实验成功率.需要通过PCR技术获得目的基因的大量拷贝.与体内DNA复制相比.PCR反应体系需加入哪两种特别的物质? (3)将基因表达载体导入ES细胞.从中筛选出成功发生了同源重组的ES细胞.然后培育出小鼠. ①由ES细胞培育出小鼠的过程中.需要采用哪些技术手段? ②通过检测目的基因是否表达出蛋白质产品.可以确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组.请简述这种检测方法. 查看更多

 

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