27.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点.圈l.圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点.请回答下列问题: (1)一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后.分别含有 ▲ 个游离的磷酸基团. (2)若对图中质粒进行改造.插入的SmaⅠ酶切位点越多.质粒的热稳定性越 ▲ . (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒.不能使用Srna Ⅰ切割.原因是 ▲ . (4)与只使用EcoR I相比较.使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒.外源DNA的优点在于可以防止 ▲ . (5)为了获取重组质粒.将切割后的质粒与目的基因片段混合.并加入 ▲ 酶. (6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 ▲ . (7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因.将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体.然后在 ▲ 的培养基中培养.以完成目的基因表达的初步检测. [答案](1)0.2 (2)高 (3)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因.外源DNA中的目的基因 (4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 (5)DNA连接 (6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞 (7)蔗糖为唯一含碳营养物质 [解析]本题考查基因工程的限制性内切酶的作用特点 (1) 质粒切割前是双链环状DNA分子.所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键.故不含游离的磷酸基团.从图1可以看出.质粒上只含有一个SmaⅠ的切点.因此被改酶切割后.质粒变为线性双链DNA分子.因每条链上含有一个游离的磷酸基团.因此切割后含有两个游离的磷酸基团. (2) 由题目可知.SmaⅠ识别的DNA序列只有G和C.而G和C之间可以形成三个氢键.A和T之间可以形成二个氢键.所以SmaⅠ酶切位点越多.热稳定性就越高 (3) 质粒抗生素抗性基因为标记基因.由图2可知.标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaⅠ酶切位点.都可以被SmaⅠ破坏.故不能使用该酶剪切含有目的基因的DNA (4) 只使用EcoR I.则质粒和目的基因两端的粘性末端相同.用连接酶连接时.会产生 质粒和目的基因自身连接物.而利用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ剪切时.质粒和目的基因两端的粘性末端不同.用DNA连接酶连接时.不会产生自身连接产物. (5)质粒和目的基因连接后获得重组质粒.该过程需要连接酶作用.故混合后加入DNA连接酶. (6)质粒上的抗性基因为标记基因.用于鉴别和筛选含有重组质粒的受体细胞. (7)将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体后.含有重组质粒的个体才能吸收蔗糖.因此可利用蔗糖作为唯一碳源的培养基进行培养受体细胞.含有重组质粒的细胞才能存活.不含有重组质粒的因不能获得碳源而死亡.从而达到筛选目的. 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

(05江苏卷)(9分)加拿大一枝黄花属双子叶多年生草本植物,原产北美,作为观赏植物引人我国,现已在一些地区蔓延成灾,有“植物杀手”之称。严重威胁这些地区的生物多样性。

为了研究加拿大一枝黄花在某地区的分布与危害性,有人做如下调查:将调查的地块划分成10等份,每份内取1个样方,分别统计各样方内的植物种类和数量,计算各种植物的种群密度。近五年植物种群变化的调查结果汇总如下:

                                                                                 (单位/株?m-2

年份

种名

2000年

2001年

2002年

2003年

2004年

加拿大一枝黄花

1.9

5.1

9.4

15.1

16.5

狗牙根

8.0

6.2

5.6

3.9

1.6

巢菜

3.0

2.1

1.1

0.2

0

车前草

3.0

2.0

0.4

0

0

婆婆纳

3.2

2.8

1.7

1.3

0

泽漆

2.1

1.8

1.5

1.0

0

小蘖

2.2

1.9

1.5

1.2

1.0

狗尾草

3.2

2.5

1.5

1.1

0.6

繁缕

8.0

3.2

1.1

0.5

0

卷耳

5.4

1.4

1.0

0

0

(1)该群落中加拿大一枝黄花与其他植物向的关系是           

(2)在所给的坐标系中绘出加拿大一枝黄花和繁缕的种群密度的变化曲线。

(3)本调查采用的方法是             ;取样的关键除应考虑样方的大小和数量外,还应             ;种群密度的计算方法是             

(4)从生物多样性保护的角度考虑,本调查结果给我们的启示是          

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