I.近期，思念、三全、湾仔码头等企业生产的速冻食品相继检出金黄色葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众的普遍关注。请回答下列问题：

(1)某小组欲检测果汁类食品中是否含有金黄色葡萄球菌。经查资料：葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请完成下列实验

步骤：

①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节___________，分装到锥形瓶后___________，在无菌状态下加入卵黄液（100 mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀，立即倒平板。

②接种：取待检果汁2.5mL加入到22.5 mL的灭菌生理盐水中，制成接种样液。

实验组：将接种样液用___________法接种在含卵黄的固体培养基上。

对照组：将________用同样的方法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作空白对照。

将上述接种后的培养皿同时放在36 ⁰C的恒温箱中培养48h

③观察：观察培养基表面 _______________________________________________________

(2)葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl,所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl可以将它分离出来。此培养基属于___________ 培养基。

(3)要统计每克果汁样品中活菌数目，宜采用___________法接种，根据果汁样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

Ⅱ．某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤：

(1)分别配置_____________的培养基和__________的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用；

(2)分别向A、B培养基接种___________；

(3)把接种后的培养基放在恒温箱中3d～4d；

(4)从A、B培养基上生长的菌落中挑取生长良好的菌株，分别接种到__________中；

(5)____________________________________________________________________________。

生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。如果向含有纤维素培养基中加入刚果红染液时，刚果红会与纤维素形成红色复合物，而呈现红色，如果纤维素被降解，则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。　请分析回答下列问题：
71、纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
①最好选择          环境采集土样。
②配置培养基时，各种成分在熔化后分装前必须进行             ，接种前要进行        。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是                             。
③以下是两种培养基配方：
A培养基配方：

生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。如果向含有纤维素培养基中加入刚果红染液时，刚果红会与纤维素形成红色复合物，而呈现红色，如果纤维素被降解，则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。　请分析回答下列问题：

71、纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。

 ①最好选择           环境采集土样。

 ②配置培养基时，各种成分在熔化后分装前必须进行              ，接种前要进行         。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是                              。

③以下是两种培养基配方：

A培养基配方：

B培养基配方：

 如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌，应选择         (填编号) 培养基配方，从功能看该培养基属于           培养基。

④为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基中加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用   　　   法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生    　   的菌落作为菌种进行扩大培养。

72、进行工业化酶解时，为了使纤维素酶能反复使用，可以采用酶固定化技术，其具体方法包括如下图所示的三种，则①表示            、②表示              、③表示载体结合法。

生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。如果向含有纤维素培养基中加入刚果红染液时，刚果红会与纤维素形成红色复合物，而呈现红色，如果纤维素被降解，则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。　请分析回答下列问题：

71、纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。

 ①最好选择           环境采集土样。

 ②配置培养基时，各种成分在熔化后分装前必须进行              ，接种前要进行         。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是                              。

③以下是两种培养基配方：

A培养基配方：

B培养基配方：

 如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌，应选择         (填编号) 培养基配方，从功能看该培养基属于           培养基。

④为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基中加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用   　　   法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生    　   的菌落作为菌种进行扩大培养。

72、进行工业化酶解时，为了使纤维素酶能反复使用，可以采用酶固定化技术，其具体方法包括如下图所示的三种，则①表示            、②表示              、③表示载体结合法。

请回答下列在生物技术实践过程中，对某些实验步骤的操作中的相关问题：

(1)在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用????????? 消毒；在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解???????? 。

(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用______法来分离提取，还可以用???????????? 和?????????? 等提取植物芳香油的方法。

(3)为了检测某致病菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A，B，C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_______（填“敏感”或“不敏感”）；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____（填“敏感”或“不敏感”）；含C滤纸片周围的透明圈比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是____________________________。

(4)用来判断某选择培养基是否起到了选择分解纤维素的细菌作用，要设置的对照是（?? ）

A．未接种的选择培养基

B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

D．接种了的选择培养基