(三)分离分解纤维素的微生物的实验流程 土壤取样→选择培养(此步是否需要.应根据样品中目的菌株数量的多少来确定)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落 (1)土壤采集 选择富含纤维素的环境. (2)刚果红染色法分离纤维素分解菌的步骤 倒平板操作.制备菌悬液.涂布平板 (3)刚果红染色法种类 一种是先培养微生物.再加入刚果红进行颜色反应.另一种是在倒平板时就加入刚果红. 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

研究人员为了制备烟草(四倍体,4n=48)的叶片细胞与紫罗兰(二倍体,2n=14)的紫色花瓣细胞的原生质体,并诱导其融合形成紫罗兰烟草植株,进行了如下实验:
一、原生质体的制备
酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

试管编号
项目




V

蒸馏水(mL)
2
0
1
1
1
1
缓冲液(mL)
0
2
1
0.5
0.5
0.5
果胶酶液(mL)
0
0
0
0.5
0
0
蜗牛酶液(mL)
0
0
0
0
0.5
0
纤维素酶液(mL)
0
0
0
0
0
0.5
实验结果(绿色深浅程度)


— 
+ + +
+ + + +
+ +
(注:“+”越多表示绿色越深,“—”表示颜色无显著变化)
(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是                            ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。
(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有         
等多种酶。该实验中           是空白对照组,其设置意义是             
(3)如果对制取的烟草叶肉细胞原生质体是否还有活性进行检验,其检验的方法可以是                       
二、用同样方法制取紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液
三、原生质体融合

将等量的紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液与烟草叶肉细胞原生质体悬浮液加入到装有20%的PEG溶液的离心管中混合后,离心10min,将分离得到的融合成团的原生质体悬浮液与含有琼脂的液体培养基混合均匀后,凝固形成很薄的平板。再利用有关显微镜观察、鉴定融合的原生质体。请分析:
(4)步骤三中,若所有的原生质体均两两融合,则所得到的某一个融合的原生质体中含有的染色体数可能是                
(5)只利用显微镜观察,不借助其他手段       
   能,不能)鉴别出杂种融合的原生质体,你所依据的观察现象是                         
四、制取紫罗兰烟草的人工种子
(6)如右图2中,包埋形成人工种子过程中,先适当加热使海藻酸钠溶化,然后将溶化的海藻酸钠溶液                      ,再加入                  充分搅拌混合均匀。
若将得到的人工种子播种后成长为成紫罗兰烟草植株,杂种植株为      倍体。

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研究人员为了制备烟草(四倍体,4n=48)的叶片细胞与紫罗兰(二倍体,2n=14)的紫色花瓣细胞的原生质体,并诱导其融合形成紫罗兰烟草植株,进行了如下实验:
一、原生质体的制备
酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

试管编号
项目




V

蒸馏水(mL)
2
0
1
1
1
1
缓冲液(mL)
0
2
1
0.5
0.5
0.5
果胶酶液(mL)
0
0
0
0.5
0
0
蜗牛酶液(mL)
0
0
0
0
0.5
0
纤维素酶液(mL)
0
0
0
0
0
0.5
实验结果(绿色深浅程度)


— 
+ + +
+ + + +
+ +
(注:“+”越多表示绿色越深,“—”表示颜色无显著变化)
(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是                              ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。
(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有            等多种酶。该实验中             是空白对照组,其设置意义是                 
(3)如果对制取的烟草叶肉细胞原生质体是否还有活性进行检验,其检验的方法可以是                                           
二、用同样方法制取紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液
三、原生质体融合
将等量的紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液与烟草叶肉细胞原生质体悬浮液加入到装有20%的PEG溶液的离心管中混合后,离心10min,将分离得到的融合成团的原生质体悬浮液与含有琼脂的液体培养基混合均匀后,凝固形成很薄的平板。再利用有关显微镜观察、鉴定融合的原生质体。请分析:
(4)步骤三中,若所有的原生质体均两两融合,则所得到的某一个融合的原生质体中含有的染色体数可能是                            
(5)只利微镜观察,不借助其他手段    (能,不能)鉴别出杂种融合的原生质体,你所依据的观用显察现象是                         
四、制取紫罗兰烟草的人工种子
(6)如下图2中,包埋形成人工种子过程中,先适当加热使海藻酸钠溶化,然后将溶化的海藻酸钠溶液         ,再加入          充分搅拌混合均匀。 若将得到的人工种子播种后成长为成紫罗兰烟草植株,杂种植株为         倍体。
                                     

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研究人员为了制备烟草(四倍体,4n=48)的叶片细胞与紫罗兰(二倍体,2n=14)的紫色花瓣细胞的原生质体,并诱导其融合形成紫罗兰烟草植株,进行了如下实验:

一、原生质体的制备

酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是________,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。

(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有________等多种酶。该实验中________是空白对照组,其设置意义是________。

(3)如果对制取的烟草叶肉细胞原生质体是否还有活性进行检验,其检验的方法可以是________。

二、用同样方法制取紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液

三、原生质体融合

将等量的紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液与烟草叶肉细胞原生质体悬浮液加入到装有20%的PEG溶液的离心管中混合后,离心10 min,将分离得到的融合成团的原生质体悬浮液与含有琼脂的液体培养基混合均匀后,凝固形成很薄的平板。再利用有关显微镜观察、鉴定融合的原生质体。请分析:

(4)步骤三中,若所有的原生质体均两两融合,则所得到的某一个融合的原生质体中含有的染色体数可能是________。

(5)只利用显微镜观察,不借助其他手段________(能,不能)鉴别出杂种融合的原生质体,你所依据的观察现象是________。

四、制取紫罗兰烟草的人工种子

(6)如图中,包埋形成人工种子过程中,先适当加热使海藻酸钠溶化,然后将溶化的海藻酸钠溶液________,再加入________充分搅拌混合均匀。

若将得到的人工种子播种后成长为成紫罗兰烟草植株,杂种植株为________倍体。

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生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇,其技术流程为:纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。如果向含有纤维素培养基中加入刚果红染液时,刚果红会与纤维素形成红色复合物,而呈现红色,如果纤维素被降解,则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。 请分析回答下列问题:
71、纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
①最好选择          环境采集土样。
②配置培养基时,各种成分在熔化后分装前必须进行             ,接种前要进行        。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板倒过来放置,这样做的目的是                             。
③以下是两种培养基配方:
A培养基配方:

KH2P04
Na2HP04
MgS04.7H20
纤维素酶
葡萄糖
尿素
琼脂
1.4g
2.1g
0.2g
1g
10.0g
1.0g
15.og
B培养基配方:
KH2P04
NaN03
Na2HP04.7H20
MgS04.7H20
KCl
纤维素粉
酵母膏
水解酪素
0.9g
lg
1.2g
0.5g
0.5g
5g
0.5g
0.5g
 如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌,应选择        (填编号) 培养基配方,从功能看该培养基属于          培养基。
④为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在鉴别培养基中加入刚果红染液,将筛选获得的菌液稀释后用      法接种到鉴别培养基上,然后挑选产生      的菌落作为菌种进行扩大培养。
72、进行工业化酶解时,为了使纤维素酶能反复使用,可以采用酶固定化技术,其具体方法包括如下图所示的三种,则①表示           、②表示             、③表示载体结合法。

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生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇,其技术流程为:纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。如果向含有纤维素培养基中加入刚果红染液时,刚果红会与纤维素形成红色复合物,而呈现红色,如果纤维素被降解,则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。 请分析回答下列问题:

71、纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。

 ①最好选择           环境采集土样。

 ②配置培养基时,各种成分在熔化后分装前必须进行              ,接种前要进行         。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板倒过来放置,这样做的目的是                              。

③以下是两种培养基配方:

A培养基配方:

KH2P04

Na2HP04

MgS04.7H20

纤维素酶

葡萄糖

尿素

琼脂

1.4g

2.1g

0.2g

1g

10.0g

1.0g

15.og

B培养基配方:

KH2P04

NaN03

Na2HP04.7H20

MgS04.7H20

KCl

纤维素粉

酵母膏

水解酪素

0.9g

lg

1.2g

0.5g

0.5g

5g

0.5g

0.5g

 如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌,应选择         (填编号) 培养基配方,从功能看该培养基属于           培养基。

④为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在鉴别培养基中加入刚果红染液,将筛选获得的菌液稀释后用        法接种到鉴别培养基上,然后挑选产生        的菌落作为菌种进行扩大培养。

72、进行工业化酶解时,为了使纤维素酶能反复使用,可以采用酶固定化技术,其具体方法包括如下图所示的三种,则①表示            、②表示              、③表示载体结合法。

 

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