下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？　　 。原因是　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（2）过程②称为　　　　　　　　　 。

（3）为使过程⑧更易进行，可用　　　 处理D。为了检测大肠杆菌是否产生了人胰岛素，可采用的方法是　　　　　　　　　 。

（4）下图为上图中质粒B的简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

①将用EcoRI切割后的目的基因与质粒用DNA连接酶进行连接，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有　　 种。

②将上述连接产物导入无任何抗药性的大肠杆菌细胞中然后接种到含青霉素的培养基中，能生长的大肠杆菌所含有的连接产物是 。

③在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是　　　　　　　　 。

（5）若要使A在体外通过③④⑤过程扩增，那么在此过程中所使用的酶是　　　　　　 。除酶外还需要加入引物，其作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（6）如果用该技术将一个位于DNA一端的目的基因进行扩增，那么连续扩增4次后，只含目的基因的DNA占全部DNA的比例是　　 　　 。

下图（一）为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素（抗生素）抗性基因，tct^R为四环素（抗生素）抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

（1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的      酶；二是将目的基因与运载体拼接的       酶；三是作为运载体的质粒。

（2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“          ”、“         ”、“         ”三种，其中有效的（所需要的）基因表达载体是         ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。

（3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（基因表达载体）与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（基因表达载体）是          。

（4）有效的基因表达载体成功导入受体细胞进行表达时，首先需要进行转录，RNA聚合酶识别和结合的位点是图（一）中的       。在动物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是              。在植物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是              。是因为这种微生物很容易侵染到                

中，从而把它的Ti质粒上的              转移到受体细胞染色体的DNA上。

（5）在基因工程中，作用于图（二）所示a位置的酶是        ；作用于b位置的酶是

                  。

下图（一）为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素（抗生素）抗性基因，tct^R为四环素（抗生素）抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

（1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的     酶；二是将目的基因与运载体拼接的      酶；三是作为运载体的质粒。
（2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“         ”、“        ”、“        ”三种，其中有效的（所需要的）基因表达载体是        ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。
（3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（基因表达载体）与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（基因表达载体）是         。
（4）有效的基因表达载体成功导入受体细胞进行表达时，首先需要进行转录，RNA聚合酶识别和结合的位点是图（一）中的      。在动物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是             。在植物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是             。是因为这种微生物很容易侵染到                
中，从而把它的Ti质粒上的             转移到受体细胞染色体的DNA上。
（5）在基因工程中，作用于图（二）所示a位置的酶是       ；作用于b位置的酶是
                。

（8分）下图（一）为某基因工程中利用的质粒简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素（抗生素）抗性基因，tct^R为四环素（抗生素）抗性基因。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

（1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的             酶；二是将目的基因与运载体拼接的              酶；三是作为运载体的质粒。
（2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的运载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有：目的基因－目的基因、目的基因－运载体和运载体－运载体三种，其中有效的（所需要的）重组DNA是                 ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。
（3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（重组DNA）导入无任何抗药性的原核宿主细胞，并接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（重组DNA）是               。含有效的重组基因（目的基因-运载体）的原核宿主细胞在含青霉素的培养基上_________（能/不能）生长。
（4）在动物基因工程中，将重组DNA导入受体细胞的常用方法是         。
（5）图（二）中，作用于a 位置的酶是              ；作用于b 位置的酶是                 。