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    ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因.为研究该基因对叶绿素合成的控制.需 要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞.构建过程如下: 第①步:用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段. 第②步:将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1. 第③步:将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除.用一段红霉素抗性基因取代.得到重组质粒2. 第④步:将重组质粒2导入蓝藻细胞.由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同.所以能准确地与其发生同源重组.产生出缺失ch1L基因的突变株. 请根据上述资料.回答下列问题: (1)第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶? . PCR扩增DNA时必须加入引物.引物的实质是 .其作用是 . (2)利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环.每次循环都要经过三个步骤.其中“复性 这一步 骤发生的变化是 .为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响.应如何设置对照? . (3)构建重组质粒1.2时.为保证成功率.往往使用 酶对基因和质粒进行切 割.以切出相同的黏性末端.便于连接.此酶的作用是将DNA分子的 键打开. (4)质粒是基因工程中最常用的运载体.其化学本质是 .此外还可用噬菌体.动植物病毒作用 为运载体. (5)导入重组质粒2以后.往往还需要进行检测和筛选.可用 制成探针.检测是否导入了重 组基因.在培养基中加入 可将变异株细胞筛选出来. 【查看更多】

     

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