基因工程中，须使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC－，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是

A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

B．目的基因和质粒用限制酶Ⅰ切割

C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

14分）、某质粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示，请回答下列问题。

(1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来源属于______                          。

(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制，也不能______                    。

(3)在构建重组质粒时,应选用______       和_____        _两种酶对______           和_____               _进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。

(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。

培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______       、_____             _。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是______       菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的______           作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株从        水平鉴定烟草植株的耐盐性。

(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______          技术，愈伤组织经______               进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加                      。