题目列表(包括答案和解析)
CTAB法是一种从高等真核生物细胞中制备基因组DNA(总DNA)的技术。CTAB能跟核酸形成复合物,在高盐溶液(>0.7 mol/L的NaCl溶液)中可溶并且稳定存在,当降低溶液中盐的浓度(<0.3 mol/L的NaCl溶液),CTAB-核酸的复合物就会因溶解度降低而沉淀,再用70%酒精浸泡可洗脱掉CTAB;氯仿能使蛋白质发生变性而沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下:
①在50 ml离心管中加入20 ml CTAB抽提缓冲液(主要成分是1.4 mol/L的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中预热;
②将20 g新鲜的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中,用液氮速冻并研磨成粉末,加入上述离心管中,于65℃水浴中保温30 min;
③取出离心管中,冷却至室温,加入20 mL的氯仿,轻轻混匀20 min;
④在室温下以12000 r/min的转速离心10-20 min;
⑤将上清液移入另一个离心管中,加入2/3体积的经冷却的异丙醇,用玻璃棒轻轻搅动,小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB-核酸的复合物沉淀;
⑥将沉淀移入另一个离心管中,加入70%乙醇洗涤,重复洗涤1-2次;
⑦吹干乙醇后,将DNA溶于适量的TE缓冲液中,在0.8%的琼脂糖凝胶上电泳分离并在核酸紫外检测仪上观察。
请回答下列问题:
(1)植物基因组DNA(总DNA)的提取通常采用机械研磨的方法,常温下研磨时,
植物细胞匀浆含有多种酶类对DNA的提取产生不利的影响。用液氮速冻,材料在研磨时易于破碎,同时还具有________________的作用。
(2)实验步骤③、④的目的是________________。
(3)实验步骤⑤中,玻璃棒上出现沉淀的主要原因是________________。
(4)对DNA进行定性检测常用的试剂是________。琼脂糖凝胶电泳是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及________、________,使带电分子产生________而实现分离。DNA在260 nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰,利用核酸紫外检测仪可以进行________。
生物技术的广泛应用,不仅带来了较好的经济效益和社会效益,更使人们的生活变得更加丰富多彩。如普通洗衣粉已经逐渐被加酶、加香洗衣粉所替代;微生物发酵技术为我们制造了许多营养丰富的美味食品;植物色素的利用让食物变得更加温馨诱人;植物组织培养技术加快了优良品种的快速推广。请回答下列有关问题:
(1)从自然界获得的微生物必须经过 才能应用于工业生产。果汁生产中常用的果胶酶广泛存在于植物果实和微生物中,工业上通常采用 等微生物发酵来生产果胶酶。
(2)从微生物分离获得的酶通常需要检测 ,以便更好地将酶用于生产实践。目前使用的加酶洗衣粉都是一次性的,如果将酶固定在载体上,这些酶还可以被重复利用,这种方法制成的酶叫 。
(3)将生物体内的酶进行分离可用凝胶电泳法,其原理是根据蛋白质分子的 来分离蛋白质。
(4)高档洗衣粉中常加入一些由植物芳香油制成的香精,食品着色常使用从植物体内提取的植物色素。实验室常用 法提取植物色素。
(5)有些农作物往往因为病毒积累导致产量降低,利用组织培养 技术培养可以获得不含病毒的脱毒苗。
(6)利用微生物发酵的方法可以获得果酒、果醋。在果酒基础上酿制果醋的过程中,除需接种醋酸菌外,还必须保持 条件。
(16分)
I.某地农业技术员对一片耕地退耕还林前后土壤中小动物类群丰富度进行了研究。结果见下表(表中单位为:个/m2)
(1)农业技术员采用的是 取土样的方法;退耕还林后比退耕还林前土壤中动物的营养结构要 。
(2)影响土壤中小动物分布的因素有 。
(3)为了发展经济林,当年退耕后农民种植了果树等,近年已进入收获期。现在农民打算在该林区发展多种经营增加收人。你认为在该林区适合种植 ,既可以使物质和能量得到充分利用,又可以提高生态系统的稳定性。
Ⅱ.西北农业大学的科学家们将抗烟草花叶病毒的基因与土壤农杆菌的质粒进行重组。下图表示构建重组质粒和筛选含抗烟草花叶病毒基因的土壤农杆菌的过程请据图回答:
(1)构建重组质粒需要 酶,为了促进重组质粒导入土壤农杆菌的过程,常用
处理土壤农杆菌。
(2)分析图中B、C两个培养基上的菌落存活情况,含抗烟草花叶病毒基因的菌落位于(选填“B”或“C”) 上。
(3)将含有重组质粒的土壤农杆菌.转人烟草的叶肉细胞后,通过植物组织培养技术培养成抗烟草花叶病毒的烟草植株,为检测转基因烟草是否抗烟草花叶病毒,可采用
的方法检测烟草体内是否含烟草花叶病毒的蛋白质。若含有,则转基因烟草不抗 就草花叶病;若不含有,则转基因烟草抗烟草花叶病。
下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图回答。
(1)在基因工程操作程序中,图中①②表示 ,⑦表示 ,⑧表示 ,⑩表示目的基因的检测与鉴定。不能利用人的唾液腺细胞来完成①过程的原因是 。
(2)过程②必需的酶是 酶。过程③是DNA受热 后解链为单链,③④⑤表示的PCR技术需要的条件有:模板DNA、四种脱氧核苷酸、 、 、稳定的缓冲液和严格的温度控制设备。
(3)在利用A和B获得C的过程中,必须用 切割A和B,使它们产生 ,再加入 ,才可以形成C。
(4)基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在DNA水平上检测的方法是 。在蛋白质水平上进行检测的方法是从大肠杆菌中提取蛋白质,进行 ,观察是否产生杂交带。
(5)为使过程⑧更易进行,可用Ca2+处理D,使其成为 细胞。
下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图回答。
(1)在基因工程操作程序中,图中①②表示 ,⑦表示 ,⑧表示 ,⑩表示目的基因的检测与鉴定。不能利用人的唾液腺细胞来完成①过程的原因是 。
(2)过程②必需的酶是 酶。过程③是DNA受热 后解链为单链,③④⑤表示的PCR技术需要的条件有:模板DNA、四种脱氧核苷酸、 、 、稳定的缓冲液和严格的温度控制设备。
(3)在利用A和B获得C的过程中,必须用 切割A和B,使它们产生 ,再加入 ,才可以形成C。
(4)基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在DNA水平上检测的方法是 。在蛋白质水平上进行检测的方法是从大肠杆菌中提取蛋白质,进行 ,观察是否产生杂交带。
(5)为使过程⑧更易进行,可用Ca2+处理D,使其成为 细胞。
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