（12分）下图为DNA分子的切割和连接过程，据图回答下列问题：?（每空1分）

（1）EcoRI是一种           酶，其识别序列是                 ，切割位点是           与           之间的            键。切割后产生的DNA片段末端称为              　　。?
（2）不同来源的DNA片段“缝合”，需要的酶应是　　　　    ，它们根据来源可分为                和                  两类。
（3）若切割下的目的基因进行PCR扩增。试回答下列问题：
①扩增的前提，是要一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合
成               。
②扩增的过程是：目的基因DNA受热        后解链为单链，再通过一个称为复性的环节后，新的子链开始合成。新的子链合成过程中需要在               催化作用下才可以不断延伸。如此重复循环多次。

（12分）下图为DNA分子的切割和连接过程，据图回答下列问题：?（每空1分）

（1）EcoRI是一种            酶，其识别序列是                  ，切割位点是            与            之间的             键。切割后产生的DNA片段末端称为              　　。?

（2）不同来源的DNA片段“缝合”，需要的酶应是　　　　     ，它们根据来源可分为                 和                  两类。

（3）若切割下的目的基因进行PCR扩增。试回答下列问题：

①扩增的前提，是要一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合

成                。

②扩增的过程是：目的基因DNA受热         后解链为单链，再通过一个称为复性的环节后，新的子链开始合成。新的子链合成过程中需要在                催化作用下才可以不断延伸。如此重复循环多次。

（22分）回答下列I、Ⅱ小题：

I．下图为人体血糖平衡调节示意图。请据图回答有关问题：

（1）正常情况下人体血糖降低的主要原因是                           。

（2）图示中的调节中枢是            ，胰高血糖素的受体细胞主要是         细胞。

（3）从图示可以看出胰高血糖素与胰岛素在调节血糖平衡上具有拮抗作用，除此之外，  胰高血糖素与肾上腺分泌的               在调节血糖平衡上具有协同作用。

（4）胰高血糖素分泌增加会直接             胰岛素的分泌，间接           胰岛素的分泌。

Ⅱ．以重组DNA技术为核心的基因工程正在改善着人类的生活。请回答下列问题：

（1）获得目的基因的方法通常包括             和           。

（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是             和            。

（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或                ，后者的形状成                      。

（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率            ，所以在转化后通常需要进行                   操作。

（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌生产胰岛素，该过程除了涉及基因工程外，还涉及            工程，两者生产的胰岛素在功能和           序列上是相同的。

回答下列有关基因工程和克隆技术的问题。（10分）

2006年12月22日，我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

63、说出绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中用到了哪些生物工程技术？           　

利用了哪些原理？                      （本题答案从下列所给选项中选择填写）

①转基因技术；②细胞核移植技术；③胚胎移植技术；④干细胞技术；⑤动物细胞培养技术

⑥基因突变；⑦基因重组；⑧动物细胞核具有全能性；⑨动物细胞具有全能性

64、过程①②中必需用到的酶分别是                和                 。绿色荧光蛋白基因之所以能与质粒重组，原因是                                               。

65、早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及               等物质。

通过上图中过程①的方法获取目的基因的数量是有限的，要获得大量的绿色荧光蛋白基因可以利用PCR技术。PCR扩增反应（如下图所示）中加入的TaqDNA聚合酶能在接近沸点的条件下，发挥延伸DNA子链的作用，将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。请回答：

PCR（DNA聚合酶链式反应）技术示意图：

66、你认为TaqDNA聚合酶一定是从下列哪种生物体细胞中分离提取的？        

A．水母细胞         B．猪胎儿成纤维细胞   　C．极端嗜热菌     D．大肠杆菌

67、下面的表达式不能反映TaqDNA聚合酶的功能，为什么？                           。

68、用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点和标出碱基对数。（2分）