3从红细胞中分离出血红蛋白的过程为:洗涤红细胞.释放血红蛋白.分离血红蛋白.透析.洗涤红细胞的目的是什么? 除去血浆蛋白的杂蛋白.有利于后续步骤的分离纯化. 红细胞的洗涤过程为 血液+柠檬酸钠→低速短时离心→吸出上层血浆→红细胞+5倍体积生理盐水 →缓慢搅拌10min→低速短时离心→吸出上清液→反复洗涤直至上清液无黄色 思考:加入柠檬酸钠有何目的?为什么要低速.短时离心?为什么要缓慢搅拌? 防止血液凝固,防止白细胞沉淀,防止红细胞破裂释放出血红蛋白. 思考:你有什么方法将红细胞中的血红蛋白释放出来? 加入蒸馏水.用玻璃棒快速搅拌一段时间. 补充:加入蒸馏水后红细胞液体积与原血液体积要相同.加入甲苯的目的是溶解细胞膜.有利于血红蛋白的释放和分离.此时.红细胞破碎混合液中不仅含有血红蛋白.而且还含有细胞破碎物.脂质.甲苯有机溶剂等.怎样除去这些杂质呢?由于它们的密度不同.科学家采取了离心分离的方法: 红细胞破碎混合液→中速长时离心→滤纸过滤除去脂质→分液漏斗分离出血红蛋白 查看更多

 

题目列表(包括答案和解析)

.对血红蛋白的研究结果表明,血红蛋白实际上是由珠蛋白、原卟啉和二价铁离子(Fe2+)所组成的结合蛋白质。有4条肽链各结合一个辅基即血红素,O2结合于Fe 2+上,血红蛋白与氧疏松结合形成氧合血红蛋白(HbO2),这种氧合作用于氧分压高时容易进行,于氧分压低时易于解离。红细胞结合和携带O2的过程并不影响二价铁离子,也就是说不使之氧化为三价铁离子(Fe 3+无携带O2的能力)。CO与Hb的亲和力大于O2,结合成HbCO后不能重新分离,致使Hb丧失运输O2和CO2的机能,此称一氧化碳中毒即煤气中毒。

(1)用凝胶色谱法分离出血红蛋白时,待_________接近色谱柱底端时,才用试管收集。血红蛋白因含_______而呈现红色。

(2)要使血红蛋白从红细胞中释放出来,可选用_____________________________的方法。

(3)红细胞具有运输氧的功能,是因为具有_________________________________的特性。

(4)亚硝酸盐为强氧化剂,进入人体后,可使血红蛋白失去运输氧的功能,导致组织缺氧,其可能的原因是                    

 

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红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是有血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。根据材料回答下列问题:

(1)实验前取新鲜血液,要切记在采血器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。

    ①加入柠檬酸钠的目的是     

②以上所述的过程即是样品处理,它包括           、分离血红蛋白溶液、透析。

(2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析,这就是样品的粗分离。

①透析的目的是     

②透析的原理是     

(3)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,在纯化的过程中,从层析液中先洗脱出来的是分子质量较      蛋白质。

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基因蛋白质与性状这三者间存在着密切的关系,回答下列问题:

(1)电泳是指带带电颗粒在电场作用下向着与其相反的电极移动的现象。通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳,观察到正常人和镰刀形细胞贫血症患者的血红蛋白电泳行为如下图所示。由图可知携带者有        种血红蛋白,从分子遗传学的角度作出的解释是                       

(2)现假设已分离到某种微生物的4种突变体(1-4),它们都因为某一种酶的缺失而不能合成生长必需的物质E,在该微生物合成物质E的途径中,物质A、B、C、D都是必需的,但不知它们的合成顺序;于是分析了这几种物质对各种突变体生长的影响。结果如右表(注:+为生长,-为不生长)。用字母(A~E)和箭头表示该代谢过程中五种物质的先后顺序,并标出突变体3终止于哪一个代谢过程                     

(3)从以上两个实例可知,基因控制生物性状的方式有                          

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某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中,准备从猪的血液中初步提取血红蛋白,设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下:

 

试回答下列有关问题:

(1)样品处理中红细胞的洗涤要用________反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌,可以破碎红细胞,破碎细胞的原理是________。

(2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是________,若要尽快达到理想的透析效果,可以________(写出一种方法)。

(3)一同学通过血红蛋白醋酸迁维薄膜电泳,观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有________种血红蛋白,从分子遗传学的角度作出的解释是_________________________________________。

 

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单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病。已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb,镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者,为了能生下健康的孩子,每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果的示意图。

(1)从图中可见,该基因突变是由于    引起的。正常基因和突变基因经过酶切后,凝胶电泳分离酶切片段,与探针杂交后可显示出不同的带谱,正常基因显示        条带谱,突变基因显示        条带谱。

(2)根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。这对夫妇4次妊娠的胎儿Ⅱ-1~Ⅱ-4中需要停止妊娠的是       , Ⅱ-4的基因型为      

(3)正常人群中镰刀型细胞贫血症基因携带者占1/10000,I-2若与一正常女性再婚,生出患病孩子的几率为                 。

(4)镰刀型细胞贫血症是基因突变产生的血红蛋白分子结构改变的一种遗传病,细胞内参与血红蛋白合成的细胞器是            。S同学说血红蛋白的分泌与细胞膜有关,你认为对吗?为什么?                                       

 

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