现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，利用动物细胞

培养的方法能够鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱：请完成下列实验报告。

Ⅰ.实验材料：小白鼠胚胎。   

Ⅱ．药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、

锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。

Ⅲ．实验原理：                                                 ，根据这些变异细胞占全部

培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。

Ⅳ．实验步骤：

（1）制备细胞悬液：把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加人胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬液。

（2）进行细胞培养：

①取A、B、C三个洁净的培养瓶，                                    。

②                                                      。

③                                                      。

（3）制作临时装片：

①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液迅速杀死细胞，将细胞固定在不同的分裂时期。

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央，加1—2滴一定浓度的           染色，3—5 min后，盖上盖玻片，制成临时装片。

（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于                  期的细胞，并与                      对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数（Q值）。

V．实验结果：

培养瓶	A	B	C
Q值	1.3%	12.5%	0.1%

Ⅵ．实验结论：                                                      。

 

现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题。?

【实验原理】有毒物质能诱导细胞产生变异，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。?

【实验材料】活的小白鼠胚胎。?

【药品用具】胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片。?

【实验步骤】?

（1）制备细胞悬浮液：把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入        处理，使胚胎组织分散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。

（2）进行细胞培养：?

①取A、B、C三个洁净的培养瓶，         ，加入等量的细胞悬浮液。

②向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入          ，向C瓶内加入等量的生理盐水，并将培养瓶摇匀。?

③在实验中，C培养瓶起什么作用？              。

（3）制作临时装片?

①当细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞          ，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞。?

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用                  染色，3～5 min后，盖上盖玻片。?

（4）镜检和统计?

把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于      期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计                     。

【结果与结论】?

经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：Q_A=1.3%、Q_B=12.5%、Q_C=0.1%，由此可知该实验的结论是                                。   

 

（14分）现有甲乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告，并回答有关问题。

Ⅰ.实验材料：活的小白鼠胚胎。

Ⅱ.药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。

Ⅲ.实验原理： _                                                 __，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。

Ⅳ.实验步骤：

（1）制备细胞悬浮液：

把活的小白鼠胚胎放入在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。

（2）进行细胞培养：

①取A、B、C三个洁净的培养瓶，__________                          ___________。

②向A、B两培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀。C瓶不作处理，作为对照。

③_________________                                                     。

（3）制作临时装片：

①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，  使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液以迅速杀死细胞并固定细胞分裂相。

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的悬浮液。滴在与培养瓶有相同编号的  载玻片的中央，___________           __，3～5min后，盖上盖玻片，制成临时装片。

（4）镜检和统计：

把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于_________  期的细胞，并与______________                __对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该细胞总数的百分数（Q值）。

V.结果与结论：

经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3％、QB=12.5％、QC=0.1％，由此可知该实验的结论是____________________________________________。

 

以下是有关现代生物技术的两个问题，请回答：

Ⅰ（5分）：下列三图分别表示基因的结构示意图和利用基因工程培育抗虫棉过程示意图。请据图回答下列有关问题：

（1）图C中的目的基因是从图A和图B中的哪一个图所表示的基因提取的？    ___，图C中科学家在进行[①]操作时，要用___             ____分别切割运载体和目的基因，运载体的 黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端通过___           ____而结合。

（2）[III]是导入目的基因的受体细胞，经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交产生F₁代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的_______。

（3）将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，往往有很多植株不再具有抗虫特性，原因是_________________   ____。

Ⅱ（10分）：现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员计划通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列有关问题。

实验原理：_____________________________________     __。（2分）根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。

材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。

实验步骤：

（1）制备细胞悬浮液。

把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。

（2）进行细胞培养。

①取A、B、C3个洁净的培养瓶，分别放入___________________________________；

②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液，C瓶中加入等量的蒸馏水，摇匀；

③把3个培养瓶放在适宜温度的恒温箱中培养。

（3）制作临时装片。

①当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，用            

处理，加入动物细胞固定液，迅速杀死细胞并固定细胞分裂相；

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，滴加__________________进行染色，3—5min后，盖上盖玻片。

（4）镜检和统计。

     把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜观察，为清晰观察染色体的形态，最好寻找处于______________期的细胞，并与小白鼠正常细胞有丝分裂同时期高倍显微照片进行对比，统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）。

结果分析与结论：

（1）经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：Q_A=1．3%, Q_B=12．5%, Q_C=0．1%,

由此可知该实验的结论是__________________________________________。（2分）⑵在实验中，C培养瓶起______________作用，C瓶的Q值说明____________________。

 

现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的高低。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列有关试验：

试验原理：有毒物质会使动物细胞发生染色体变异，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（一下称Q值），可判断该化学物质的毒性的高低。

材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微镜照片。

试验步骤：

（1）制备细胞悬浮液：

把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入         液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。

（2）进行细胞培养，观察甲、乙两种物质的毒性有无及高低：

①取3个洁净的培养瓶，编号A、B、C，然后依次加入         。

②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的适宜浓度的甲、乙溶液，C瓶中加入         ，振荡、摇匀。

③把3个培养瓶放在37度（或适宜温度）的恒温箱中培养。

（3）制作临时装片：

①当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，再一次用         液处理，然后加入动物细胞固定液，迅速杀死细胞并固定细胞分裂相。

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，加2滴         进行染色，3—5min后，盖上盖玻片。

（4）镜检和统计：

把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜观察，然后再用高倍镜，寻找处于有丝分裂        

期的细胞，并与小白鼠正常细胞有丝分裂同一时期高倍显微照片进行对比，统计并计算该期变异的细胞占该细胞总数的百分数并做好记录（Q值）。

结果分析与结论：

（1）在试验中，C培养瓶起         作用。

（2）经研究人员试验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：Q_A=1.3%,Q_B=12.5%.

Q_C=0.01%，由此可得出该试验的结论是                                   。