（17分）基因工程又叫基因拼接技术。

（1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的       为模板，   　   成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。

（2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、  　　　　  。

（3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：  　　　　 和   　　　 。

（4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。

（5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有____________和____________等。

（6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术.某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生     个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是           个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：

①                                                                  。

②                                                                  。

（7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有      ，       以

及             。[来源:学#科#网Z#X#X#K]

（8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行             杂交，若有           出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。

控制哺乳动物的性别对于畜牧业生产有着十分重要的意义。目前，分离精子技术是有效的性别控制方法。例如：牛的X精子的DNA含量比Y精子的高出4%左右，利用这一差异人们借助特殊仪器将它们分离开来，再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管牛（如下图所示）。

根据以上信息回答下列相关问题：

（1）图中过程①通常采用的是__________技术，在这个过程中_________的精子与卵细胞结合形成受精卵。为获得更多的卵细胞需要给良种母牛注射适宜剂量的__________。

（2）过程②中受精卵培养发育至________时期，再经胚胎移植到代孕母牛，从而获得后代。若希望同时获得多个性状相同的个体，可以使用__________技术。

（3）动物“生物反应器”是转基因动物技术中最诱人的部分之一。为了提高牛奶中赖氨酸的含量，某大学研究人员利用现代生物工程技术，得到了一头转入外源赖氨酸基因的克隆奶牛，预计将来其分泌的乳汁中含有更多的赖氨酸。下图为培育转基因克隆动物的技术流程图，获得外源赖氨酸基因所需要的工具酶是__________。该基因不能从人体细胞中获得，原因是____________________。

已知该奶牛培育过程中所用受体细胞为一只雌性奶牛胎儿的成纤维细胞，导入目的基因常用的方法是_________________，把该含有外源基因的受体细胞培育成为一头奶牛还需要用到的技术有____________________（至少写出两种）。

（15分）请回答下列有关生物工程的问题：

（1）对于基因工程来说，其核心步骤是                ，若要培育能从乳汁中分泌人的干扰素的转基因牛，需要选择的受体细胞是____________(受精卵、乳腺细胞)，导入该细胞最有效的方法是                。为了让转入的干扰素基因高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的             和             之间。

（2）植物体细胞杂交过程中，在把植物细胞杂交之前，必须用____________去除细胞壁，杂交过程的另一个环节是__________________；培育出诸如“番茄—马铃薯”这样的杂种植株利用了植物细胞全能性的原理。胚胎干细胞也有类似的特性，并且胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖而不发生        。

（3）在进行单克隆抗体的生产过程中，要把两种细胞进行融合，这两种细胞一种是在体外能够大量增殖的             ，另外一种是已免疫的B细胞；诱导该两种细胞融合常用的因素有PEG、        、灭活病毒等。体外培养的过程中，贴壁生长的细胞会出现_________现象。

（4）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其             。另外，培养的卵母细胞需要发育至                             期，为使雌性个体一次排出多枚卵母细胞，常采用             激素进行处理。

（5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的             原理。

【生物——选修3：现代生物科技专题】（15分）   。
（1）对于基因工程来说，其核心是                               ；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是                      。
（2）植物体细胞杂交过程有两个关键，一个是在把植物细胞杂交之前，必须               
                   ；另外一个是                                 。
（3）在进行单克隆抗体的生产过程中，要把两种细胞进行融合，一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞，另外一种是                      ；诱导该两种细胞融合常用的因素有PEG、电激、                    等。
（4）胚胎干细胞在功能上具有发育的              性，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生           。
（5）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。
①进行转基因操作前，需用___________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。
②为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。
③采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________；在PCR反应过程中，有一个环节是从较高的温度冷却到相对较低的55℃左右，其作用是                                              。
利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

【生物——选修3：现代生物科技专题】（15分）   。

（1）对于基因工程来说，其核心是                               ；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是                      。

（2）植物体细胞杂交过程有两个关键，一个是在把植物细胞杂交之前，必须               

                   ；另外一个是                                 。

（3）在进行单克隆抗体的生产过程中，要把两种细胞进行融合，一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞，另外一种是                      ；诱导该两种细胞融合常用的因素有PEG、电激、                    等。

（4）胚胎干细胞在功能上具有发育的              性，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生           。

（5）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。

①进行转基因操作前，需用___________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

②为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

③采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________；在PCR反应过程中，有一个环节是从较高的温度冷却到相对较低的55℃左右，其作用是                                              。

利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。