应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：
材料一：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦，将疫苗藏身于水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

（1）过程①⑤所需要的工具酶有                   ，构建的乙肝表面抗原蛋白基因表达载体一般由                                  等部分组成。
（2）过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞，受体细胞应选择          ，采用最多的也是最有效的导入方法是           ；
过程⑥是将重组质粒导入莴苣受体细胞，受体细胞可为                 ，采用最多的导入方法是                 。
（3）通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从         中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。还可以形成膀胱生物反应器，从         中提取所需蛛丝蛋白，简化提取过程。
资料三：PCR技术（聚合酶链式反应）是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：

（4）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述正确的是:(    )

A．该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键；

B．该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键；

C．该过程不需要解旋酶的作用；

D．该过程与人体细胞的过程完全相同；

（5）从图中可知，催化C过程的酶是  　         ，它与正常细胞内的酶区别是 　    ；PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外，还需要满足的两个基本条件是                        。
（6）如果把模板DNA的两条链用¹⁵N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃-55℃-72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有¹⁵N标记的DNA占     。如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸                  个。

应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：

材料一：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。

材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦，将疫苗藏身于水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

（1）过程①⑤所需要的工具酶有                    ，构建的乙肝表面抗原蛋白基因表达载体一般由                                   等部分组成。

（2）过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞，受体细胞应选择           ，采用最多的也是最有效的导入方法是            ；

     过程⑥是将重组质粒导入莴苣受体细胞，受体细胞可为                  ，采用最多的导入方法是                  。

（3）通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从          中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。还可以形成膀胱生物反应器，从          中提取所需蛛丝蛋白，简化提取过程。

资料三：PCR技术（聚合酶链式反应）是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：

（4）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述正确的是:(    )

A．该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键；

B．该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键；

C．该过程不需要解旋酶的作用；

D．该过程与人体细胞的过程完全相同；

（5）从图中可知，催化C过程的酶是   　          ，它与正常细胞内的酶区别是  　     ；PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外，还需要满足的两个基本条件是                         。

（6）如果把模板DNA的两条链用¹⁵N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃-55℃-72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有¹⁵N标记的DNA占      。如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸                   个。

 

研究发现仅在大豆叶肉细胞中存在一种多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGP)，它能够特异性地抑制部分致病真菌细胞内的多聚半乳糖醛酸酶的活性，从而减弱病原菌对植株的侵害。研究人员成功地将PGP基因导入小麦体内，以期获得抗根腐病能力更高的小麦新品种。请分析回答问题：

(1)反转录法是基因工程中获得目的基因的常用方法，本研究中获取模板RNA的大豆细胞最好取自　　　，在提取RNA过程中要特别注意防止RNA的水解，试提出一种保护措施：　　　　　　　　　　　　　　　。

(2)目的基因的扩增常采用PCR技术，而PCR引物的设计是获得大量高纯度目的基因的关键。引物中碱基数量越多，则引物的特异性越　　　　。

(3)下图是本研究使用的质粒载体pAHC25的酶切图谱。用限制酶Sac I和BamH I同时处理pAHC25，结果会产生　　　种不同的片段。在构建含PGP基因的表达载体时，分析质粒酶切图谱，研究人员选择了有单一酶切点的限制酶Sma I和Sac I作为本研究的工具酶，其优点是　　　　　　　　　　　　　　。

(4)研究人员用基因枪法转化该小麦的幼胚细胞，选择幼胚细胞的原因是　　　　　　　　　　，容易诱导形成植株。

 

33．(8分)研究发现仅在大豆叶肉细胞中存在一种多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGP)，它能够特异性地抑制部分致病真菌细胞内的多聚半乳糖醛酸酶的活性，从而减弱病原菌对植株的侵害。研究人员成功地将PGP基因导入小麦体内，以期获得抗根腐病能力更高的小麦新品种。请分析回答问题：

(1)反转录法是基因工程中获得目的基因的常用方法，本研究中获取模板RNA的大豆细胞最好取自_____________，在提取RNA过程中要特别注意防止RNA的水解，试提出一种保护措施：_____________。

(2)目的基因的扩增常采用PCR技术，而PCR引物的设计是获得大量高纯度目的基因的关键。引物中碱基数量越多，则引物的特异性越_____________。

(3)右图是本研究使用的质粒载体pAHC25的酶切图谱。用限制酶Sac I和BamH I同时处理pAHC25，结果会产生_____________种不同的片段。在构建含PGP基因的表达载体时，分析质粒酶切图谱，研究人员选择了有单一酶切点的限制酶Sma I和Sac I作为本研究的工具酶，其优点是_____________。

(4)研究人员用基因枪法转化该小麦的幼胚细胞，选择幼胚细胞的原因是_____________，容易诱导形成植株。

基因敲除是根据DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段，从而达到基因敲除的目的。运用基因敲除技术构建基因敲除动物模型是研究基因功能中较为普遍的一种方法，其基本原理如下图所示。

请回答下列问题：

（1）在将目的基因导入受体细胞前，需要构建一个基因表达载体。一个理想的基因表达载体，通常由启动子、终止子、目的基因和            等四部分组成。在此过程中，所需使用的相关工具酶是                    。

（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则选择的受体细胞通常为              ，基因导入该细胞时，可以采用                    等方法。

（3）上述途径所获得的动物，其后代并非每一个个体都含目的基因，原因是       。

（4）假设通过基因敲除构建了一个非球形红细胞性贫血(Ⅱ型)模型动物，该动物因丙酮酸激酶缺陷或葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺陷，使红细胞膜变化引起红细胞自溶现象，但若向该动物注射ATP后，自溶现象可明显降低。由此可表明，基因对生物性状的控制方式之一是：                    。

（5）某实验小组向正常小鼠胚胎细胞内导入某“X基因”后，发现靶基因能正常转录形成mRNA,但细胞内却不再合成相应蛋白质，其原因最可能是              。