31. 〖解析〗从表中可以看出，实验者是用第4支试管来作为对照的，在实验步骤中，要达到每支试管中溶液总量均为2.0ml,比较各组中的变量关系,就会发现1、2、3支试管中的区别应该是酶的种类不同，第4支试管中不加酶，而加入等量的蒸馏水，其它因素均相同。故在1号试管中应补充等量的缓冲液，2号试管中应补充等量的微生物B的提取物，3号试管中也补充与其它试管等量的纤维素县浮液，4号试管中应补充的蒸馏水量=1.4+0.1=1.5ml。欲检测四支试管的实验产物的量，可用班氏试剂或斐林试剂，出现的现象是红黄色或砖红色，含糖量越多，颜色越深。上述结果中，若不考虑酶的最适PH和最适温度的差异，在酶浓度也相同时，酶活性的差异就应该是酶本身的差异了，如酶的氨基酸序列不同或空间结构不同。上述三种微生物中，产物中含糖量最大的说明其酶的活性最强，即微生物B最有开发的价值。开发此酶可以解决农产品秸秆转化问题，可以为利用农产品的废弃物来生产饲料或酒精等开辟新机遇等。

〖答案〗【实验步骤】（2）如下表

（4）班氏  加热（加热至沸腾）

【分析讨论】（1）4  （2）红黄色  （3）不同酶的氨基酸序列不同（不同酶的空间结构不同）  （4）微生物B  （5）葡萄糖可用作制取酒精的原料；用纤维素代替化石燃料（言之有理即给分）

31．（08?上海?41）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。请完善实验方案，并回答相关问题。

【实验目的】比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性。

【实验原理】纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖，用葡萄糖的产生速率表示酶活性大小；用呈色反应表示葡萄糖的生成量。

【实验材料】三种微生物（A～C）培养物的纤维素酶提取液，提取液中酶蛋白浓度相同。

【实验步骤】

（1）取四支试管，分别编号。

（2）在下表各列的一个适当位置，填写相应试剂的体积量，并按表内要求完成相关操作。

（3）将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时。

（4）在上述四支试管中分别加入        试剂，摇匀后，进行              处理。

（5）观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅。

【实验结果】

微生物A提取物

微生物B提取物

微生物C提取物

颜色深浅程度

＋

＋＋＋

＋＋

【分析讨论】

（1）该实验中的对照组是       号试管。

（2）实验组试管均呈现的颜色是             ，但深浅不同。

（3）上述结果表明：不同来源的纤维素酶，虽然酶蛋白浓度相同，但活性不同。若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异，其可能原因是                                     。

（4）你认为上述三种微生物中，最具有应用开发价值的是         。

（5）从解决能源问题的角度，开发这种纤维素酶的意义在于                         

                                                            。

30. 〖解析〗血球计数板直接记数的是细菌总数，不能排除死菌。

〖答案〗D

30．(08?广东理基?39)取少量酵母菌液放入血球计数板直接记数，测得的数目是（  ）

A．活细胞数　　　　B．死细胞数       C．菌落数　　　　　D．细胞总数

29. 〖解析〗（1）②中的选择培养基中应加入苯酚作为碳源，②中不同浓度的碳源A影响细菌数量，稀释涂布平板法来测定②中活菌数目。

（2）④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤培养基的中加入苯酚作为碳源。使用释涂布平板法或平板划线法可以在（6）上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时要倒置培养，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基。

（3）5支洁净培养瓶→分别加入相同培养基（加等量的苯酚，用pH试纸检测这5支瓶内培养基的pH值，用苯酚调试使之相等，苯酚是唯一的碳源）→分别接种5种等量的来自不同菌株的菌种→在相同的适宜条件下培养相同时间→再用pH试纸检测这5支瓶内培养基的pH苯酚显酸性，不同菌株的菌种降解苯酚的能力不同，5支瓶内培养基中的苯酚被分解的量不同，所以pH值不同。用pH试纸检测这5支瓶内培养基的pH值，从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小。

（4）从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作。

〖答案〗（1）苯酚  稀释涂布平板法    

（2）④的培养基没有加入苯酚作为碳源     释涂布平板法或平板划线法      以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基。

（3）用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量

（4）培养基灭菌、接种环灭菌、接种过程无菌操作。

29．(08?广东?38)苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品，请回答下列问题：

（1）②中培养口的菌株的选择培养基中应加入        作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基          （A.影响；B.不影响）细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用          法。

（2）④为对照、微生物在④中不生长、在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于         ；使用         法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？

（3）如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？

（4）实验过程中如何防止其它微生物的污染？

28. 〖解析〗杂交实验中，不管是正交还是反交，后代性状总是与母本性状保持一致，可确定是细胞质遗传（该药物是影响光合作用过程，故抗药基因极可能是位于叶绿体）。

A和C既是一个选择培养的过程，也是一个扩大培养的过程。选择的条件是氮源（莠去津或氮气）和（或）氧气；通过扩大培养可提高选择出来的所需细菌的密度。

固体培养基中的氮源只有莠去津及空气中的氮气。有透明带菌落说明该菌落的细菌分解了使培养基不透明的莠去津；无透明带菌落的细菌并没有分解莠去津，那么它们利用的氮源应是氮气，是自生固氮菌。

〖答案〗（1）NADPH   叶绿体基质   （2）细胞质中

（3）①自然选择

②初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌）并提高其密度        培养液中缺少甲类细菌可利用的氮源或（和）有氧条件抑制了甲类细菌的生长      对数

③氮气   莠去津

28．(08?天津?31)莠去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使用的除草剂之一。

（1）莠去津的作用机理之一是阻断光反应中的电子传递过程，影响NADP^＋形成　　　　　，进而影响在　　　　　　　　　　　中进行光合作用的暗反应过程，最终抑制杂草生长。

（2）从使用莠去津农田中，选到了能遗传的耐莠去津杂草，将它与敏感莠去津植株杂交，结坚果见下表：

杂交亲本

后代中耐药型植株比例（%）

后代中敏感型植株比例（%）

耐药型♀×敏感型♂

100

0

敏感型♀×耐药型♂

0

100

由表推断，控制该耐药性状的基因位于　　　　　　　　。

（3）莠去津在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下面程序选育能降解莠去津的细菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。

据图回答：

①由于莠去津的　　　　　作用，在长期使用莠去津的土壤中可能含有目的菌。

②下图是A～C瓶中三类细菌的最大密度柱形图，由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　；甲类细菌密度迅速降低的主要原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　；从A瓶中应选择细菌生长处于　　　　　　期的菌液加入到B瓶中，培养效果会更好。

③在固体培养基中，无透明菌落利用的氮源主要是　　　　　　　　　　　　；有透明带菌落利用的氮源主要是　　　　　　　　　　，据此可筛选出目的菌。

27. 〖解析〗蓝藻（蓝细菌）是原核生物，进行光合作用，是自养需氧生物，在生态系统的成分中属生产者，在营养结构中是处于第一营养级。蓝藻毒素是蓝藻的次级代谢产物，可使蓝藻在生存斗争中处于较有利的地位。原癌基因在正常情况下是处于被抑制状态，当在致癌因子作用下原癌基因被激活，正常细胞分化成为癌细胞。对数期的菌体形态和生理特征稳定，所以微生物培养中，通常选用对数期菌体作为菌种进行培养。题干中已经提示，“在每个培养皿中”“做三个重复实验”，所以只能在一个培养皿中选择三个不同位置，且是重复实验，处理条件是完全相同的。实验组是滴加含溶藻细菌的培养液，那么对照组就滴加不含溶藻细

菌的培养液，其他条件均相同（如加的培养液的量、光照、培养的温度等）。由于蓝藻先培养，先形成菌落（绿斑），后加入溶藻细菌的培养液，溶藻细菌分解绿斑里的蓝藻，最终会使蓝藻的菌落（绿斑）褪色成为空斑（蓝澡彻底被裂解死亡）。

〖答案〗⑴原核 第一营养级 自养需氧型

⑵不是 从抑制状态变成激活状态

⑶对数

⑷在每个培养皿中，选择三个不同位置，各滴加等量菌液 在每个培养皿中，选择三个不同位置，各滴加等量的、不含溶藻细菌的溶藻细菌培养液

⑸被溶藻细菌裂解（死亡）

27．(08?北京?31)水华可因蓝藻爆发所致。科研人员尝试利用某种细菌限制蓝藻数量，相关实验的示意图如下。图中①～⑥表示实验步骤。

请回答问题

（1）从细胞结构的特点与复杂程度上看，蓝藻属于　　　　　细胞；从生态系统的营养结构上看，蓝藻属于　　　　　细胞。蓝藻的停放类型通常是　　　　　　　　　　　。

（2）引发水华的蓝藻可产生蓝藻毒素。蓝藻毒素　　　　　　（是、不是）蓝藻生长、繁殖所必需的物质。蓝藻毒素对人是一种致癌因子，可使原癌基因　　　　　　　，导致正常细胞发生癌变。

（3）图中②、⑤通常使用的是①、④中已培养至　　　　　　　期的蓝藻和溶藻细菌。

（4）图中⑤实验组在每个培养皿中，如果做三个重复实验，可采取的做法是：　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（5）蓝藻通常呈蓝绿色，观察实验结果，发现培养皿中出现褪色空斑，说明蓝藻　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。