8．(6分)应用生物工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

(1)在培育转人生长激素基因牛过程中，②过程常用的方法是　　　　　 　　。

(2)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有　　　　　　　　　　　　 。

(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体， Ⅱ最可能是　　　　　　 细胞，Ⅲ代表的细胞具有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 的特点。

(4)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是　　　　　　　　　　　　　　 ，⑤过程采用的技术是　　　　　　　　 。

(1)DNA限制性内切酶和DNA连接酶　(2)启动子、终止子、标记基因

(3)

(4)农杆菌转化法　 (5)多聚半乳糖醛酸酶　　 　(6)脱分化和再分化

(7)导入的抗多聚半乳糖醛酸酶基因位于染色体上，转基因番茄产生的花粉细胞中可能含有该基因，通过花粉会污染其它生物

改进方案：将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入到番茄植物细胞的线粒体或叶绿体中。_{高◎考※资*源＄}

7．(6分)下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。

(1)　　　　　　　　　　　　 技术是单克隆抗体技术的基础。

(2)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是　　　　　　　 ________ 　。

(3)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速　　　　　　　　　　 特点，又具备淋巴细胞的　　　　　　　　　　 特点，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行　　　　　　　 和　　　　　　　　 ，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或小鼠腹腔内增殖，就可以提取出大量的单克隆抗体了

6．(8分)回答下列有关动物细胞培养的问题：

(1)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作　　　 　　进行攻击。

(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现　　　　　　 　现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成　　　 　　细胞，该种细胞的黏着性　 　　，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量　　 　。

(3)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到　　 　　期的细胞用显微镜进行观察。_K^S*5U.

(4)在细胞培养过程中，通常在　　　 　　条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中　　　的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低

5．(5分)1970年，特明和巴尔的摩证实了RNA病毒能依赖RNA合成DNA的过程，并发现了催化此过程的酶。下面为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请根据图解回答下列问题：

(1)催化①过程的酶是　　　　　　　　 ；核酸酶H的作用是　　　　　　　　　　　　 。

(2)③过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90~95℃时才能完成，　 说明DNA分子具有　　　　　　　　　　 性。

(3)由图中信息分析可知，催化②⑤过程的酶都是　　　　　　　　　 ，两者在作用特性上的区别是　 　　　　　　　　　　　　　　　　。

4．(8分)番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。(操作流程如第5页的图)请回答：

(1)过程①需要的工具酶有　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(2)在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(3)提取目的基因采用的限制性核酸内切酶的识别序列和切点是-↓GATC-。在目的基因的两侧各有1个酶的切点，请画出目的基因两侧被限制酶切割后形成的黏性未端的过程示意图

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　。

(4)在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做　　　　　　　　 。

(5)从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接导致了　　　　　　　　　 无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。

(6)培养②、③为植物组织培养过程中的　　　　　　　　　　　　　　　 。

(7)上述转基因番茄会通过花粉将抗多聚半乳糖醛酸酶基因传播给其它植物而造成基因污染，原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ，请你提出一个上述转基因工程的改良方案，以防止这样的污染发生。 　　　　　　　　　　　　　　　。

3．(11分)回答下列有关体内受精和胚胎发育的相关问题

(1)精子细胞的变形过程中　　　　　 变为精子头部的主要部分、　　　　　 发育为头部的顶体、　　　　 演变为精子尾、　　　　 聚集在尾的基部形成　　　　 鞘、其他物质浓缩为球状的原生质滴，最后脱落。

(2)受精场所是在母体的　　　　 内。

(3)动物胚胎发育的过程中：卵裂期细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积　　　　　　　 ；囊胚期细胞开始出现　　　　 ，聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为　　　　 ，将来发育成胎儿的各种组织；原肠胚具有　　　　 腔和　　　　 腔

2．(10分)回答下列有关动物细胞工程的相关问题

(1)动物细胞培养的流程：取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)--→剪碎--→用　　　　　　　　 酶处理分散成单个细胞→制成　　　　 →转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞用　　　　　　　　 酶处理分散成单个细胞继续　　　　 代培养。在此过程中，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的　　　　 。

(2)动物细胞培养需要满足以下条件：

①　　　　　　　　　 ；

②营养：在合成培养基中通常需加入　　　　 等天然成分。

③适宜　　　　 ；

④气体环境：95%空气+5%CO₂。O₂是细胞代谢所必需的，CO₂的主要作用是　　　　　　　　　 。

(3)动物细胞融合的意义：使　　　　　　　　　 成为可能，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。

1．(11分)回答下列有关基因工程的相关问题

(1)“分子手术刀”是指：　　　　　　　　　 ，其来源主要是从　　　　 生物中分离纯化出来的，其切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：　　　　 末端和　　　　 末端

(2)“分子缝合针”是指：　　　　 ，催化形成的是两个核苷酸之间的　　　　 键。

(3)“分子运输车”是指载体，最常用的载体是­­　　　　 ,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

(4)基因工程的基本操作程序：第一步：　　　　　　　　　 ；第二步：　　　　　　　　　 ；第三步：　　　　　　　　　 ；第四步：　　　　　　　　　 。

15．关于桑椹胚和囊胚的比较,以下说法不正确的是

A．囊胚期细胞分化是由于遗传物质突变引起的

B．囊胚期的细胞出现了细胞分化,但遗传物质未发生改变

C．桑椹胚的各细胞结构功能基本相同

D．囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平的差异，而是转录水平上的差异引起的

14．下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是

A．叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞，且含叶绿体

B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织

C．融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜

D．叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性