5、胚胎冷冻保存技术

(1)概念：将动物的早期胚胎，通过特殊的保护剂和降温措施，使其长期保存在超低温环境下。

(2)优势：可以使胚胎移植不受时间和地域的限制，简化引种过程。

4、胚胎分割技术

(1)概念：用显微手术方法将早期胚胎切割成2、4、8等份，经体内或体外培养后植入受体，以获得同卵双生或同卵多生后代的技术[可看作是动物无性繁殖或克隆]。

(2)基本过程：选择良好的桑椹胚或囊胚移入培养皿中，用分割针或分割刀片将其切开，吸出其中的半个胚胎注入透明带中或直接移植给受体。(注意：内细胞团要均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育)

3、胚胎移植技术

(1)概念：将雌性动物的早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

(2)优势：可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，缩短供体本身的繁殖周期。

(3)胚胎移植的生理学基础

①同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的(对供体和受体进行同期发情处理)。

②早期胚胎形成后处于游离状态，为胚胎的收集提供可能。

③受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应。

④移入受体的供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。

(4)胚胎移植的程序：

①对供、受体母牛进行选择，用激素进行同期发情处理。

②对供体母牛用激素(促性腺激素)做超数排卵处理。

③选择同种优秀公牛配种(有性生殖过程)。

④对胚胎进行收集(此时胚胎处于游离状态)。

⑤对胚胎进行质量检查(此时胚胎应发育到桑椹胚或囊胚)

⑥胚胎移植(或冷冻保存)。

⑦检查受体母牛是否受孕。

⑧产下胚胎移植的犊牛。

[例7]下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是(　　 )

A. 受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植

B. 受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态

C. 超数排卵技术要使用一定的激素

D. 试管婴儿只是受精即早期卵裂过程在试管中进行

2、早期胚胎培养

(1)培养液成分

哺乳动物胚胎的培养成分一般都比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及血清等物质。

(2)培养过程

　　 ①精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。

②当胚胎发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。

[说明]不同动物胚胎移植的时间不同，例如，牛、羊一般要培养到桑椹胚阶段或囊胚阶段才进

行移植，小鼠和家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎，即试管胚胎，可在4

个细胞阶段移植。

[例6]胚胎早期培养需要用液体培养基，此培养液的成分是(　　 )

A．水、无机盐、维生素、激素、有机盐、氨基酸、核苷酸、血清等

B．蔗糖、水、无机盐、维生素、激素

C．蔗糖、水、无机盐、氨基酸、核苷酸、血清

D．水、无机盐、维生素、有机盐、淀粉等

胚胎工程是对动物生殖细胞、受精卵和早期胚胎细胞所进行的多种显微操作和处理技术，由体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术、胚胎冷冻保存技术和性别控制技术等组成的现代生物技术。胚胎发育学是胚胎工程的理论基础。

1、体外受精技术

(1)概念：是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。(属有性生殖过程)

(2)基本原理：人工模拟体内环境，包括营养、温度、pH等，使初级卵母细胞成熟，同时使精子获能，最终完成受精作用，并有计划地保存胚胎等。

(3)操作--卵母细胞的采集和培养 对体型小的动物用促性腺激素处理，从输卵管冲取卵子(可直接受精)；对体型大的动物从卵巢中采集卵母细胞(要在体外培养成熟)。

体外受精技术是哺乳动物胚胎移植技术、克隆技术、转基因技术和性别控制技术不可缺少的组成部分。

[例5]我国首例“虎狮兽”2002年在南京红山动物园诞生。它是利用了雄虎的精子和雌狮的卵

子进行“体外受精”而产生。下列有关说法正确的是(　　 )

A．在体外受精前，要对精子进行获能处理　　　　

B．用化学物质处理掉卵黄膜便于精子进入

C．抽取精子、卵子的细胞核进行融合　　　

D．精子入卵后进行人工处理防止多精入卵

3、各个时期的特点

(1)卵裂期：合子形成后即在输卵内进行有丝分裂，这个过程叫卵裂。其特点是：细胞分裂为有丝分裂，细胞的数量增加，但胚胎的总体积不增加或略有缩小，因此每个细胞的体积会随分裂的进行不断缩小，但核内遗传物质并未减少。

(2)桑椹胚：当胚胎数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹，叫桑椹胚。这一阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能干细胞。

(3)囊胚: 桑椹胚继续分裂，中间出现一个腔，腔内充满液体，称为囊胚。

a. 细胞出现分化--内细胞团和滋养层，内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层将来发育成胎膜和胎盘。

b. 出现囊胚腔，是胚胎内部一个含有液体的囊腔。

c. 发生孵化，即囊胚进一步扩大，导致透明带破裂，胚胎从中伸展出来。

(4)原肠胚：特点：一孔：胚孔；两腔：扩大生原肠腔，缩小的囊胚腔；三胚层：外胚层：由内细胞团表层细胞形成；中胚层：由内细胞团的部分表层细胞和部分下方的细胞共同形成；内胚层：内细胞团下层的细胞形成。

1、概念：是指受精卵发育成幼体的过程。(受精过程的完成，标志着胚胎发育的开始。)

2、过程

受精卵→卵裂→桑椹胚→囊胚→原肠胚→胚层分化→胎儿

3、减数分裂和受精作用的意义：对于维持每种生物前后代体细胞中染色体数目的恒定，对于生

物的遗传和变异，都是十分重要的。

3、受精作用的结果：使单倍体的精子和卵子结合形成二倍体的受精卵，染色体数目恢复到体细

胞中的数目，其中一半染色体来自父方，另一半来自母方。

2、防止多精入卵受精的两道屏障

屏障一：透明带反应。当精子越过放射冠，进入透明带并接触卵黄膜的瞬间，卵子发出指令(信号)，产生阻止后续的精子进入透明带的生理反应。

屏障二：卵黄膜封闭作用。当第一个精子进入卵黄膜后，会立即引起卵黄膜的紧缩、增厚，产生阻止其他精子进入卵内与卵子结合受精的生理反应，也叫做多精子入卵阻滞。