4．设，若，则(　　 )

A．　　　　　 B．　　　　　　 C．　　　　 D．

3．已知复数，则(　　 )

A．　　　　　　 B．　　　　　 C．　　　　　 D．

2．双曲线的焦距为(　　 )

A．　　　　　　　 B．　　　　　　　 C．　　　　 D．

1．已知集合，，则(　　 )

A．　　　　　　 B．　　　　　　 C．　　　　 D．

34．(8分) “基因靶向”技术，指的是应用DNA同源重组原理，通过一定的载体，用设计好的目的基因替代靶基因，从而达到使靶基因功能丧失的目的。借助这一技术，科学家可以用小鼠进行实验，使其体内的某项特定基因丧失功能，以帮助人们找到治疗疾病的有效方法。下面是该实验的基本过程，请回答有关问题。

(1)获得胚胎干细胞(ES细胞)。实验一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞，这是因为ES细胞具有发育的______________。

(2)获取目的基因。

①目的基因是靶基因的同源片段。经过修饰使靶基因的功能改变或丧失，就可获得目的基因。如果要获得活性降低了的x酶蛋白的目的基因，可以采用蛋白质工程技术，请简述其过程。

②为了提高实验成功率，需要通过PCR技术获得目的基因的大量拷贝。与体内DNA复制相比，PCR反应体系需加入哪两种特别的物质?　　　　　　　　　　 ，　　　　　　　　　　 。

(3)将基因表达载体导入ES细胞，从中筛选出成功发生了同源重组的ES细胞，然后培育出小鼠。

　　 ①由ES细胞培育出小鼠的过程中，需要采用哪些技术手段?

②通过检测目的基因是否表达出蛋白质产品，可以确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组。请简述这种检测方法。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

33．(6分)下图为哺乳动物胚胎分割和性别鉴定示意图。请据图回答：

(1)胚胎分割时，一般采用发育良好、形态正常的　　　　　　　　　 。对胚胎进行分割时，要特别注意将　　　　　　　　 均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。来自同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，因此，胚胎分割可以看作动物　

　　　　　　　　　　 的方法之一。

(2)①过程分割出的少量胚体细胞用来做性别鉴定，该技术常采用的方法是　　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(3)通常胚胎干细胞可以从　　　　　　　　　　　　　　 (写出两种方法)中分离得到。

(4)早期胚胎中的胚胎干细胞，不仅可以被应用于哺乳动物胚胎性别鉴定，还可被应用　

　　　　　　　　　　　　　 (举一例)等领域。

32.(7分)白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。以白菜为母本、甘蓝为父本。经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜－甘蓝”杂种幼苗。请回答问题：

⑴白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在　　　　隔离。自然条件下，这两个物种间不能通过　　 　的方式产生后代。

⑵为观察“白菜－甘蓝”染色体数目和形态，通常取幼苗的　　　　　做临时装片，用　　　染色。观察、计数染色体的最佳时期是　　　　。

⑶二倍体“白菜－甘蓝”的染色体数为　　　　。这种植株通常不育，原因是减数分裂过程中　　　　　　　　　　。为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜－甘蓝”。

31.(6分)下面是以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。

(1)进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下(光照14h，黑暗10h)饲养成年雌鼠，并注射促进性腺激素，目的是　　　　　　 。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是　　　　　 。再在37℃，5%CO₂条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天右以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎_________期开始的标志。

(2)如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞)，处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(3)如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(4)如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

30．(8分)在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

请据图回答：

(1)A过程需要的酶有_______________________________________________。

(2)B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是____________________

____________________________________________________________。

(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。

(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________

________________________________________________作为探针。

(5)科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。

①将转基因植株与________________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。

②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。

29．(8分)图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有　　　　　 、　　　　　 、　　　　 三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行　　　　　　　　　 。

(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是　　　　　 　　　　　　　　　　　　。

(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是　　　　　　　 ，其合成的产物是　　　　 。

(4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是　　　　　　　　　　 。