一)实验目的:
1.初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。
2.探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。
二)方法步骤:
步骤 |
注意问题 |
解释 |
取4支洁净试管,编号,分别加入2mL H2O2溶液 |
不让H2O2接触皮肤 |
H2O2有一定的腐蚀性 |
将2号试管放在900C左右的水浴中加热,观察气泡冒出情况,与1号对照 |
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向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液,观察气泡产生情况 |
不可用同一支滴管 肝脏研磨液必须是新鲜的 肝脏在制成研磨液 |
由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶,会影响实验准确性 因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低 研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积 |
2-3min后,将点燃的卫生香分别放入3号和4号试管内液面的上方,观察复燃情况 |
放卫生香时,动作要快,不要插到气泡中 |
现象:3号试管产生气泡多,冒泡时间短,卫生香猛烈复燃,4号试管产生气泡少,冒泡时间长,卫生香几乎无变化 避免卫生香因潮湿而熄灭 |
实例2:温度对酶活性的影响
一).实验原理:
鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算,质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。
提出问题→作出假设→设计实验→(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)→实施实验→分析与结论→表达与交流。
实例1:比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率
2.培养实验设计能力。
1.探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。
2.当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时,红细胞会不会发生质壁分离?为什么?
答:不会。因为红细胞不具细胞壁。
实验七 探究影响酶活性的因素(必修一P78、P83)
步 骤 |
注 意 问 题 |
分 析 |
1.制作洋葱表皮的临时装片。 在载玻片上滴一滴水,撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平(也可挑取几条水绵放入水滴中)。盖上盖玻片。 |
盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片,然后轻轻放平。 |
防止装片产生气泡。 |
2.观察洋葱(或水绵)细胞 可看到:液泡大,呈紫色,原生质层紧贴着细胞壁。(或水绵细胞中有带状叶绿体,原生质层呈绿色,紧贴着细胞壁。 |
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液泡含花青素,所以液泡呈紫色。 先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。 |
3.观察质壁分离现象。 从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。镜检。观察到:液泡由大变小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。 |
重复几次 糖液浓度不能过高 |
蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度,细胞通过渗透作用失水,细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大,液泡和原生质层不断收缩,所以发生质壁分离。 为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。 否则,细胞严重失水死亡,看不到质壁分离的复原。 |
4.观察细胞质壁分离的复原现象。 从盖玻片的一侧滴入清水,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。镜检。观察到:液泡由小变大,颜色由深变浅,原生质层恢复原状。 |
发生质壁分离的装片,不能久置,要马上滴加清水,使其复原。 重复几次。 |
细胞液的浓度高于外界溶液,细胞通过渗透作用吸水,所以发生质壁分离复原现象。 因为细胞失水过久,也会死亡。 为了使细胞完全浸入清水中。 |
实验讨论答案:
1.如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中,这些表皮细胞会出现什么现象?
答:表皮细胞维持原状,因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。
紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色,易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。
2.质壁分离复原的原理:当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而吸水,外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
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