(一)实验题目：探究三聚氰胺能否造成动物肾部结石。

26.(7分)多氯联苯是人工合成的含碳有机氯化物，用途很广(润滑油、油漆、油墨等都含有)。其是一种致癌因子。某研究小组依照下列实验方案筛选出能降解多氯联苯的微生物：

(1)配制④的固体培养基时，除添加③中液体培养基成分外，还应添加1%的____________。

(2)设置⑥的目的是___________________。⑥与⑦培养基的主要区别在于　　　　 ；使用　　　　 法可以在④上获得单菌落。

①一③重复培养的目的是___________________________________________.

(3)实验中培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气所采用的灭菌、消毒方法依次是(　 )

　①化学消毒　 ②灼烧灭菌　 ③干热灭菌　 ④紫外线灭菌　 ⑤高压蒸汽灭菌　 ⑥巴氏消毒法

A．⑤③②①④　　 　B．①②③④⑤　 　C．⑥②③④①　　 　D．③④②①⑥

(4)日本科学家发现了一种生有超过身长1/10“大嘴”的细菌，可以大口吞噬物质，于是联想到可以通过生物技术手段高效降解多氯联苯等污染物。下列技术中最可能使用的是：

A、PCR技术　　 B、固定化细胞技术　　 C、单克隆抗体技术　　 D、基因工程技术

[答案]

(1)琼脂；(2)对照实验说明通过培养的确得到了欲分离的目标微生物　 ⑥的培养基没有加入多氯联苯作为碳源　　 稀释涂布平板法或平板划线法　　 增大分解多氯联苯微生物的比例；(3)A；(4)D；

27．(8分)下图表示花药离体培养及单倍体育种的大致过程，据图回答下列问题：

( 1 )过程 ① 是把幼小的花药分离出来，在无菌条件下放在MS培养基上进行离体培养，配制该培养基时，需要的物质应该有　　　　　 。(至少答三种) (2分)

( 2 )过程 ② 是花药在MS培养基所提供的特定条件下脱分化，发生多次细胞分裂，形成　　　　　　　　　　　　　　　　 ，此过程进行细胞分裂的方式是　　　 　　　　。

( 3 )过程 ③ 是诱导再分化出芽和根，最后长成植株，长成的植株(不考虑核与核之间融合)是　　　　 　　植株，其特点是植株弱小，高度不孕 ，生产上没有推广应用的价值，若要使其结子结果，可在移栽后在幼苗　　　　　 滴加适宜浓度的B物质，通常用到的B物质是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(4)过程②与过程③所用培养基有差异，主要是　　　　　　　　 的差异。

[答案]

⑴水，大量元素，微量元素，蔗糖，琼脂，植物激素，有机物等(任答三种都给分)

(2)愈伤组织或胚状体　　　有丝分裂　　 (3)单倍体或花粉　　　 茎尖　　 秋水仙素　　 (4)植物激素

28．(10分)ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。

第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：

(1)第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？　　　　 。

PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是　　　　　 ，其作用是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(2)利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是　　　　　　　　　 。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？　　　　　　　　　　　 。

(3)构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用　　　　　　　　　　　　 酶

对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分

子的　　　　　　　 键打开。

(4)质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是　　　　 ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

(5)导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用　　　　　　 制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入　　　　　　　 可将变异株细胞筛选出来。

答案：

(1)TaqDNA聚合酶　　 一小段DNA或RNA　 与模板结合，使DNA聚合酶从引物3’端延伸DNA链

(2)引物通过碱基互补与DNA模板链结合 　　对照组不加DNA模板，其它条件相同

(3)同一种DNA限制性内切酶　 磷酸二酯键

(4)小型环状DNA

(5)红霉素抗性基因　　 红霉素

29.(5分)镰刀形细胞贫血症是一种单基因遗传病，是由正常的血红蛋白基因(HbA)突变为镰刀形细胞贫血症基因(HbS)引起的如下图所示，该基因突变是由于_ 　_____碱基对变成了__ ____碱基对，这种变化会导致血红蛋白中__ 　　_______个氨基酸的变化。 HbA基因突变为HbS基因后，恰好丢失了一个MstⅡ限制酶切割位点。用MstⅡ限制酶切割胎儿DNA，然后用凝胶电泳分离酶切片段，片段越大，在凝胶上离加样孔越近。加热使酶切片段解旋后，用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交，荧光出现的位置可能有下图所示三种结果。若出现_ 　_____结果，则说明胎儿患病；若出现__ 　　　___结果，则说明胎儿是携带者。

　答案: T-A　　 A-T　　 1　 B　 C

30、(8分)有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合， 单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：

　(1)若a、b分别为精子和卵细胞，则产生a、b的分裂方式是____________，a和b融合形成d细胞的过程叫做____________。

(2)若a、b是两种植物的原生质体， d杂种细胞融合成功的标准是是　　　　　　　　 。从细胞质中叶绿体的组成看，这一方法还可能培育出比有性杂交品种光合作用性能更好的植株，因为　　　　　　　　　　　　　 　　　　　________　　 ________。

　　 (3)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是　　　　　　　　　　　　 。

(4)若a、b分别为骨髓瘤细胞和浆细胞，则d细胞能产生单克隆抗体的根本原因是　　　　　　　　　 _____　________。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

的特点。

(5)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是　　　　　　　　　　 。

(1)减数分裂　 受精作用

(2)再生出细胞壁　

叶绿体对光合作用性能起决定性作用，融合产生的杂种细胞具有双亲的叶绿体

(3)大于800lx光照　　

(4)d细胞继承了双亲细胞的遗传物质　　

特异性强、灵敏度高、化学性质单一 　

(5)　　　　　　　　　　　　　　　

31．(12分)通用的蛋白质测试方法“凯氏定氮法”是通过测出含氮量来估算蛋白质含量，其

含氮量一般不超过30%，而三聚氰胺的含氮量为66%左右，因此三聚氰胺也被人称为“蛋白精”。人和动物长期摄入三聚氰胺会造成生殖泌尿系统的损害、膀胱肾部结石。科研人员以鼠为实验材料，探究是三聚氰胺能否诱导大鼠的肾部结石发生。请完成下列实验：

25．下列关于生物技术的安全性分析，不合理的观点是　　　　　　　 ( A　 )

A．转基因生物进入自然界后不会与野生物种杂交而威胁其他生物的生存

B．运用重组基因技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器

C．重组的微生物在降解污染物的过程中产生二次污染

D．如果转基因花粉中有毒蛋白或过敏蛋白，可能会通过食物链传递到人体内

答案：A　　　　　　　　　　

解析：转基因生物的安全性最重要的担心就是进入自然界后与野生物种杂交而使得其它物种也获得更强的生存能力而威胁其他生物的生存，从而出现生态危机。

24．下面是科学家设计的快速繁殖良种奶牛的两种方法，下列叙述不正确的是　 ( D　 )

　 　　 A．在试管牛E和克隆牛G的培育过程中都必须用到动物细胞培养技术

　 　　 B．图中激素处理良种母牛B的目的是为了获得更多的卵细胞

　 　　 C．克隆牛G一定是公牛

　 　　 D．母牛B与公牛C杂交后代与克隆牛G的遗传信息相同

答案：D　　　　　　　　　　

解析：母牛B与公牛C杂交后代与克隆牛G的遗传信息不同，因为前者是有性生殖，涉及到基因重组，后者是无性生殖，特点是能保持亲本的优良性状。

23．下列关于动物胚胎移植的叙述中，错误的是　　　 　　　　　　　　　　　　　( A　 )

A．受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植

　　　 B．受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态

　 　　 C．超数排卵技术要使用一定的激素

　 　　 D．试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行

答案：A　　　　　　　　　　

解析：一般来说，受孕母体内的受精卵仍需要进行一段时间的体外培养。超数排卵需要使用促性腺激素处理。

22．一个婴儿出生后，医院为他保留了脐带血，在他生长发育过程中如果出现了某种难治疗的疾病，就可以通过血液中的干细胞来为其治病，关于这个实例说法正确的是　　 　　　　　　　　(　 C )

　　 A．用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病，需要激发细胞的所有全能性

　　 B．用脐带血中的干细胞能够治疗这个孩子所有的疾病

C．如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用到细胞培养技术

D．如果要移植用他的干细胞培育出的器官，应该要长期给他使用免疫抑制药物

答案：C　　　　　　　　　　

解析： 脐带血干细胞最大的优点就是自体移植不会有排斥反应，因而不需要给他使用免疫抑制药物，用脐带血干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病，不需要激发细胞的所有全能性，脐带血干细胞不能治疗所有疾病，比如意外伤害，毒药伤害等等。

21．下列关于细胞工程的叙述，错误的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ( D　 )

A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合

B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理

C．小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体

D．某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同

答案：D　　　　　　　　　　

解析：体细胞杂交是细胞融合而来的，杂种细胞染色体为两品种之和，一般构成异源四倍体，而杂交法的实质是有性生殖，故而染色体数目和亲本保持一致。

20．“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，如图2所示，其中第⑤种DNA分子有几个：(D)

A、2　　　　　 B、4　　　 　　　C、6　　　　　　 D、8

答案：D　　　　　　　　　　

解析：PCR技术扩增时，由两种引物决定所扩增的片段的特定序列，上一次循环的产物为下一次循环的模板。第一次循形成①和②，第二次循环形成①、②、③、④是个DNA，以此类推4次循环后共形成16分子DNA，其中①、②各一分子，③、④各三分子，⑤共8分子。

19．相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶色谱柱中的行进过程，可表示为图中哪一个：(B)

答案：B

解析：考查凝胶色谱法的原理，利用分子量大的蛋白质只能从凝胶间隙通过，路程短，速度快，先到达色谱柱的下端；分子量小的蛋白质分子可进入到凝胶内部的通道，路程远，速度慢，后到达色谱柱的下端。

18．下图表示对某蛋白质溶液进行SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果(相似于纸层析法分离色素)，下列相关叙述不正确的是：(　 B　 )

A、蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电，电场中带电的蛋白质分子(或多肽)会向着与其所带电荷相反的电极移动

B、蛋白质在SDS－聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度完全取决于其所带净电荷多少

C、蛋白质在SDS－聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度基本取决于其分子量大小

D、电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种，但也可能只有一种

答案：B

解析：蛋白质的氨基与羧基可发生解离，使其带正电或负电，在电场中发生迁移。SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳所加的SDS可完全掩盖蛋白质本身所带电荷，故其移动速度与本身所带电荷无关，而由其分子大小决定。SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳会使蛋白质水解成肽链，故结果所示可能只有一种蛋白质(有两种肽链)，也可能是两种蛋白质。