28、 [生物-现代生物科技专题]

继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：

(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是　　　　　　　　 。

(2)进行基因转移时，通常要将外源基因转入　　　　 中，原因是　　　　　　　　 　。

(3)通常采用　　　　　 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。

(4)在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的　　　　　 细胞中特异表达。

(5)为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的　　　　 转入　　　　 细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为　　　　　 。

答案：(1)显微注射　 (2)受精卵(或早期胚胎)　 受精卵(或早期胚胎细胞)具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达　 (3)DNA分子杂交(核酸探针)　 (4)膀胱上皮　 (5)细胞核 去核的卵　　 核移植(或克隆)

28、在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

请据图回答：

(1)A过程需要的酶有_______________________________________________。

(2)B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是____________________

____________________________________________________________。

(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。

(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________

________________________________________________作为探针。

(5)科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。

①将转基因植株与________________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。

②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。

答案： (1)限制性内切酶和DNA连接酶　　 (2)具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存　 　(3)卡那霉素　 (4)放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因

(5)①非转基因植株　 ②3：1　 ③100

27、下列有关基因工程中限制内切酶的描述，错误的是

A．一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列　

B．限制性内切酶的活性受温度的影响

C．限制性内切酶能识别和切割RNA　　　　　　　　　　

D．限制性内切酶可从原核生物中提取

答案：C

26、制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括

①细胞培养　　 ②细胞融合　　 ③胚胎移植　　 ④细胞核移植

A．①②　　　　　　 B．①③　　　　　　　 C．②③　　　　　　 D．③④

答案：A

25、下面是以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。

(1)进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下(光照14h，黑暗10h)饲养成年雌鼠，并注射促进性腺激素，目的是　　　　　　 。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是　　 　　　　。再在37℃，5%CO₂条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天右以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎_________期开始的标志。

(2)如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞)，处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(3)如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(4)如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

答案：(1)促进排卵(或超数排卵)　 使精子获能　 囊胚　 (2)容易获得纯合子并缩短育种时间　 (3)小鼠甲(体细胞)的核基因和小鼠乙(卵细胞)的细胞质基因　 (4)外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达

24、［生物-选修3现代生物科技专题］(15分)

回答下列有关动物细胞培养的问题：

⑴在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面　　时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的　　　　。此时，瓶壁上形成的细胞层数是　　。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是　　　　。

⑵随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现　　现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成　　　细胞，该种细胞的黏着性　　　，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量　　　。

⑶现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是　　　　　。

⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到　　　期的细胞用显微镜进行观察。

⑸在细胞培养过程中，通常在　　　条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中

　　　的活性降低，细胞　　　的速率降低。

⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作　　　　进行攻击。

答案：⑴相互接触　　接触抑制　　单层(或一层　)　　胰蛋白酶

⑵衰老甚至死亡　不死性　　降低　减少

⑶由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色)

⑷中　⑸冷冻(或超低温、液氮)　　酶　新陈代谢　　⑹抗原　

23、下列有关生物膜的叙述，正确的是

A．大鼠脾细胞与兔造血干细胞的细胞膜能够发生融合

B．用蛋白酶处理生物膜可改变其组成，不改变其通透性

C．在生长激素的合成和分泌过程中，生物膜只发生结构上的联系

D．兴奋在神经纤维上传导和在神经元间传递时，生物膜发生的变化是相同的

答案：A

22、下列关于细胞工程的叙述，错误的是

A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合

B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理

C．小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制务单克隆抗体

D．某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同

答案：D

21、(选作模块3；现代生物科技专题)

某二倍体植物是杂合体，图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：

(1)图中①表示的是该花粉培养过程中的　　　　 过程，②表示的是　　　 过程，X代表的是　　 ，③表示的是　　　　 过程，④表示的是诱导　　　　 过程。

(2)图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中　　

　　　 的种类及最后其浓度配比，获得的来源于未成熟花粉的完整植株都程为　　 　　植株(甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有　　　　　　　　 。

(3)植株甲进行　　　　　　　 ，才能使其结实，产生后代(乙)，否则植株甲只有通过　　　　　

的方式才能产生后代(丙)。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是　　　　 植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉基因组成种类数为　　　　　 种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为

　　　　　 种。花粉培育在育种上的特殊意义是　　　　　　　　　 　　　　，从而开辟育种新途径。

答案：(18分)

(1)脱分化　 再分化　 胚状体　 分化(或发育)　 生根(每空1分，共5分)

(2)激素　 单倍体　 细胞的全能性(每空2分，共6分)

(3)染色体加倍(其他合理答案也给分)　 无性生殖

　　 乙(或经过染色体加倍)　 一　 多(每空1分，共5分)　 缩短育种周期(2分)

20、某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染，为查找污染原因设计了4个实验，实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是

A．污染主要不是培养基灭菌时间短造成的

B．污染主要来源于组织培养所用的离体组织

C．调节培养基pH不能解决污染问题

D．调节培养温度不能解决污染问题

答案：ABCD