10.人CD20 单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药物，目前主要是通过培养哺乳动物细胞的方式生产。我国科学家已经培育出世界上第一头转入了CD20抗体基因的转基因牛，可以从它产的牛奶中直接提取CD20抗体。这项技术成熟后，有望使这一特效药的生产成本降至现在的1/10。请回答：

(1)单克隆抗体的制备需先将　　和　　融合，这一过程的诱导方法与植物体细胞杂交不同的是　　　　。

(2)动物细胞培养需要在含　　　　混合气体的培养箱中进行，培养液中通常需加入　　等一些天然成分。

(3)转基因技术的核心是　　　　　。该过程用到的工具酶有　　　和　　　。

解析：单克隆抗体是通过细胞融合技术制备的。此项技术需先获得浆(效应B)细胞，并使之与瘤细胞融合成杂交瘤细胞，此过程可用灭活的病毒诱导。在培养时需提供气体环境，其中含5%CO2，是为了维持培养液的pH。转基因技术的核心是第二步--基因表达载体的构建。答案：(1)经过免疫的B淋巴细胞　骨髓瘤细胞　可用灭活病毒诱导　(2)95%空气加5%CO2　血清、血浆　(3)基因表达载体的构建　限制性核酸内切酶(限制酶)DNA连接酶

9.下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。

(1)　　　　技术是单克隆抗体技术的基础。

(2)根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于　　　　培养基。

(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是　　　　　　。

(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用　　　　　　　　　　　　。

(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞　　　　的特点，又具备淋巴细胞　　　　的特点。

(6)淋巴细胞是由动物体　　中的　　细胞分化、发育而来的。

(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是　　　　　　　　。

解析：(1)单克隆抗体是通过细胞融合、动物细胞培养制备的，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。 (2)由图示信息可知：图中所用的培养基是选择培养基，目的是筛选出杂交瘤细胞，并将杂交瘤细胞分开，筛选之后进行扩大培养，从而获得大量抗体。

(3)单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，可被广泛应用到疾病诊断、治疗和预防等方面。

(4)动物细胞融合除了使用离心、振动、电刺激等物理方法和聚乙二醇等化学方法诱导外，通常还采用灭活的病毒诱导融合。

(5)抗体是由浆细胞分泌的，每一种浆细胞只能分泌一种特异性抗体，要想得到大量的单一抗体，必须将同一种浆细胞大量克隆，但在体外培养的条件下，一个浆细胞不能无限增殖，而骨髓瘤细胞可以在体外无限增殖，因此，通过细胞融合，得到既能分泌抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞。

(6)淋巴细胞是由动物体骨髓中的造血干细胞分化、发育而来的。

(7)杂交瘤细胞培养过程中需要吸收氨基酸、葡萄糖等营养物质，它们是通过主动

输进入细胞内的。

答案：(1)动物细胞培养　(2)选择　(3)特异性强，灵敏度高　(4)灭活的病毒　(5)在体外大量增殖　分泌特异性抗体　(6)骨髓　造血干　(7)主动运输(主动吸收)

8.基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 (　)

A.AAaa　　　　B.AaBb

C.Aabb 　　　　　　　D.BBbb

解析：基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活仙台病毒处理后，会有三种细胞融合的情况出现，Aa和Aa融合形成的细胞基因型是AAaa，Bb和Bb融合形成的细胞基因型是BBbb，Aa和Bb融合形成的细胞基因型是AaBb。

答案：C

7.以下四种细胞工程技术中培育出的新个体，只有一个亲本遗传性状的方法是　 (　)

A.植物组织培养 　　　　　　B.细胞融合

C.动物胚胎移植 　　　　　　D.细胞核移植

解析：植物组织培养的过程是无性生殖的过程，形成的新个体中只有一个亲本的遗传物质。

答案：A

6.(2010·济宁质检)用a表示骨髓瘤细胞，b表示效应B细胞，则细胞融合过程中两次筛选的目的分别为　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　(　)

A.a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→ab培养

B.a、aa、ab、bb、b→ab、bb、b→ab培养

C.a、aa、ab、bb、b→ab→产生特定抗体的ab培养

D.a、aa、ab、bb、b→aa→能无限增殖的aa培养

解析：第一次筛选是选出杂交瘤细胞即ab，第二次筛选是选出产生特异性抗体的ab细胞。

答案：C

5.下列关于细胞工程的叙述中，正确的是　　　　　　　　　　　　　　　　　 (　)

A.植物细胞工程中，融合叶肉细胞时，应先去掉细胞膜，制备原生质体

B.植物体细胞杂交培育出的新品种一定不是单倍体

C.植物细胞工程中，叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织

D.单克隆抗体制备过程中，采用不经免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合从而获得

交瘤细胞

解析：制备原生质体应先去掉细胞壁；叶肉细胞经脱分化过程才能形成愈伤组织；制备单克隆抗体时，采用经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合来获得杂交瘤细胞；植物体细胞杂交，培育出的新品种中一定含有两个物种的遗传物质，所以一定不是单倍体。

答案：B

4.单克隆抗体(单抗)实质上是单个效应B细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中，错误的是　　　　　　　　 (　)

A.单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位

B.单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术

C.在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选

D.只有用物理或化学方法的诱导，才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交

细胞

解析：诱导B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞的融合有三类方法：生物方法、物理方法和化学方法。

答案：D

3.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是　　　　　　　　　　　　　　　　 (　)

A.培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体

B.培养中的人B细胞能够无限地增殖

C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株

D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞

解析：能产生抗体细胞应为浆细胞而不是效应T细胞，瘤细胞才具有无限增殖的特点；人成熟的红细胞，因无细胞核所以进行细胞培养不能形成细胞株。

答案：D

2.某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是　　　　　　　　　　 (　)

A.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理

B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸

C.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象

D.仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒

解析：胃蛋白酶最适pH值接近于2，呈酸性，而细胞培养液的pH值接近于中性，所以不能用胃蛋白酶处理。CO2的作用是调节细胞培养液的pH值。由于存在细胞接触抑制现象，在原代培养过程中，会出现停止增殖的现象，需要传代培养获得细胞株和细胞系；病毒在活细胞内才能增殖，不能用培养细胞的培养液进行培养。

答案：C

1.(2010·苏州模拟)下列关于细胞工程的叙述，不正确的是　　　　　　　　　 (　)

A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合

B.去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理

C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体

D.动植物细胞培养都需要经过脱分化处理

解析：植物细胞培养需要经过脱分化处理，而动物细胞培养不需要，电刺激可诱导植物原生质体或动物细胞融合。用纤维素酶、果胶酶可去除植物细胞壁，用胰蛋白酶可将动物组织分散成单个细胞。小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体。

答案：D