2、如果在案件侦破过程中,只收集到一根毛发,但它所含的遗传信息太少,该怎么办呢?
★教后小记
教师在教学过程中,可以先引导学生回忆必修2的有关DNA复制的知识,在此基础上,学生可加深对于PCR原理的认识。对于PCR反应过程的教学,应以读图识图为主。教材中反应过程图解详细的描绘了参与PCR的各种组成成分;每一轮反应的三个基本步骤-变性、复性、延伸;每一步骤的作用。教师在教学中可以请学生在读图的同时,结合教科书中的文字说明来加深理解。当学生遇到难以理解的地方时,教师要及时给予解答。
例1 在( )的温度范围内,DNA的双螺旋结构解开
A. 10-20℃ B. 80-100℃ C. 20-30℃ D. 40-60℃
解析:蛋白质大多不能忍受60-80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。
答案:B
例2 关于DNA的复制,下列叙述正确的是( )
A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5’端延伸DNA链
B.DNA复制不需要引物
C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合
D.DNA的合成方向总是从子链的3’端向5’端延伸
解析:由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从引物的3’端即复制方向由3’端向5’端延伸;由于DNA分子是反向平行的,子链是依据碱基互补配对原则,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是从子链5’端向3’端延伸。
答案:C
综合应用
例3 下列有关PCR描述,不正确的是( )
A.是一种酶促反应
B.引物决定了扩增的特异性
C.扩增产量按y=(1+X)n
D.扩增对象是氨基酸序列
E.扩增对象是DNA序列
解析:PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它以极少量的DNA为模板,以四种脱氧核苷酸为原理,在引物的作用下使DNA聚合酶从引物的3’端连接脱氧核苷酸,短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝,其扩增产量为y=(1+X)n,y代表DNA片段扩增后的拷贝数,x表示平均每次的扩增效率,n代表循环次数,因此答案选D。
答案:D
课后探究
1、PCR与生物体DNA复制有何区别?
4.3计算:DNA含量=50×光吸收值×稀释倍数
4.2将100µL反应稀释液倒入比色杯中,测定在260nm处的光吸收值。
4.1反应液稀释:取2µLPCR反应液,添加98µL蒸馏水;2.分光光度计调零:将100µL蒸馏水添加到比色杯中,在260nm处将分光光度计调整读数为零。
4.结果分析与评价
3.4混匀后离心处理,使反应液集中在离心管底部。
3.3每添加一种反应成分,更换一个移液器的枪头。
3.2缓冲液和酶分装成小份,-20℃低温保存。
3.1避免外源DNA污染:所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前高压灭菌。
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