3．(江苏)下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是

　 A．固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显

B．固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧

C．利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件

　 D．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物

34．(山东)(8分)(生物一生物技术实践)

人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：

请回答：

(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行　　　　　　 　　　　　。

　　 接种前，要对人参根进行　　　　　　　 。

(2)用于离体培养的根切块，叫做　　　　　　　　 。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于　　　　　　 　污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于　　　　　　

　　 污染。

(3)用少量　　　　　 酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。

(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用　　　　　

　　 方法，操作时应采用　　　　　　　　 加热。

答案：(1)灭菌　　 消毒

　 (2)外植体　 真菌(霉菌)　　 细菌

　 (3)果胶

(4)萃取(浸取)　　 水浴

专题四酶的研究与应用

6. (安徽)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是

A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白膝培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B.取10⁴、10⁵ 、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37⁰C恒温培养24-48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

3(重庆)下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是

　 A大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是一个环状DNA分子

　 B在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源

　 C用大肠杆菌工程菌生产干扰素时．应及时添加核酸等生长因子

　 D处于对数期的大肠杆菌．常作为生产用的菌种和科研的材料

专题三植物组织培养技术

33.(10分)(全国理综2)　

利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆，具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株。　

(1)实验步骤：　

①配置________(固体、半固体、液体)培养基，该培养基的碳源应为________。　

②将_____________接入已灭菌的培养基平板上。　

③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是___________________。　

④菌落形成后，加入碘液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现_______________现象的菌落即为初选菌落，经分离、纯化后即可达到实验目的。　

(2)若已得到二株变异菌株I和II，其淀粉转化率较高，经测定菌株I淀粉酶的催化活性高，菌株II的淀粉酶蛋白含量高，经进一步研究发现，突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区，可推测出菌株I的突变发生在_________区，菌株II的突变发生在____________区。

答案：(1)①固体、玉米淀粉；②野生菌株；③(诱发野生菌株发生基因突变)对野生菌株进行诱变；④(透明圈)浅色范围大；(2)编码区、非编码区

3. (理综1卷)下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述，错误的是

A.发酵时需要不断通入无菌空气，否则会积累乳酸

B.发酵时常采用的培养基为液体天然培养基

C.从自然界分离的野生型菌株可直接用于生产

D.当菌体生长进入稳定期时，补充营养物可提高谷氨酸产量

专题二微生物的培养和应用

40(宁夏).[生物--选修1生物技术实践](15分)

　 (1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。

　 (2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________(消毒、灭菌)；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。

　 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。

　 (4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。

　 (5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

　 (6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

答案:(1)温度　 酸碱度　 易培养　 生活周期短

　 (2)灭菌　 消毒　 损伤DNA的结构

　 (3)比例合适

　 (4)鉴定(或分类)

　 (5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生.

　 (6)灭菌

39.(广东生物 A卷)(10分)现代生物科技专题

(1)饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的　　　　　　 ，然后改变植酸酶的　　　　　　 ，从而得到新的植酸酶。

(2)培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是　　　　　　　　　 。请简述获得转基因植株的完整过程。

(3)为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过

　　　　　 转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过　　　　　　 方法，从而一次得到多个转基因猪个体。

(4)若这些转基因因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？

34．(江苏)(7分)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。

　 (1)将图中①的DNA用HindIII、BamH I完全酶切后，反应管中有▲种DNA片段。

　 (2)图中②表示HindIII与Bam I酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得 ▲种重组质粒；如果换用Bst I与BamH I酶切，目的基因与质粒连接后可获得▲种重组质粒。　　

(3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的▲ 。

　 (4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T-DNA导人植物细胞，并防止植物细胞中▲对T-DNA的降解。

　 (5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞▲ 。

　(6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的▲基因频率的增长速率。

答案：(7分)(1)4　　　 (2)2 　1　　 (3)复制　　 (4)DNA水解酶

　 (5)表面无相应的特异性受体(6)抗性

45．(广东理科基础)钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获2008年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知

　　 A．该生物的基因型是杂合的

　　 B．该生物与水母有很近的亲缘关系

　　 C．绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达

　　 D．改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光

4. (安徽2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是

A．追踪目的基因在细胞内的复制过程

B．追踪目的基因插入到染色体上的位置

C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布

D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构。

32. (福建)(10分)

　　 转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：

(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶　　　 ，对　　　 进行切割。

(2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有　　　　 ，作为标记基因。

(3)香蕉组织细胞具有　　　　　　　 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的　　　　 。

答案：(10分)(1)PstⅠ、EcoRⅠ，含抗病基因的DNA、质粒，(2)抗卡那霉素基因(3)全能性，脱分化、再分化。