2．This is a new discovery that has a number of industrial　　　　　　　 (应用)

1．I’d　　　　　　 (感激)it if you could help me out of the difficult situation.

51．(14分)红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能

主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携

带O₂或CO₂，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎

动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题：

　 (1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：样品的处理、粗提取、纯化、鉴定四步。　　 实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入抗凝剂，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。样品的处理，它包括　　　　　　 、　　　　　　 、分离血红蛋白溶液、透析。　　

　 (2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。

①透析的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

②透析的原理是　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

　 (3)本试验通过　　　　 　　法将样品进一步纯化。

　 (4)对最终获得的蛋白质进行纯度鉴定采用的方法是　　　　　　 电泳。

　 (5)科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白，这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受　 到研究者重视。

①分离该抗菌蛋白也可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的　　　　　　 、大小及形状不同，在电场中的　　　　　　 不同而实现分离。

②可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉　 膏和蛋白胨主要为细菌生长提供　　　　　　 和　　　　 　　。

③分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的　　　　　　 ，确定该蛋白质的抗菌效果。

④细菌培养常用的接种方法有　　　　　　 和　　　　　　 。实验结束后，对使用过的培养基应进行　　　　　　 处理。

48．(8分)酶是生物合成的催化剂，随着生物科学技术的发展，酶已经走出实验室，走进人们的生活。酶的广泛应用离不开人们对酶的作用机理的准确认识。

　 　 (1)下图所示为人胰蛋白酶作用于一定量的某种物质(底物)，温度和pH保持在最适值，生成物量与反应时间关系，请回答下列问题：

①该酶作用的底物是　　　　　　 。

②在140分钟后，曲线变成水平，这是因为　　　　 。

③若增加胰蛋白酶浓度，其他条件不变，请在原图上画

出生成物量变化的示意曲线。

④若胰蛋白酶浓度和其他条件不变，反应液pH由2逐渐升高到l0，则酶催化反应的速度将　　　　　　 ，原因是　　　　　　 。

　 (2)加酶洗衣粉可以消除衣物上不易清除的蛋渍和奶渍。一般加酶洗衣粉的袋子上印有　 如下说明：洗涤前请将衣物浸于加有适量冼衣粉的的温水内数小时，切勿用60度以上的水；切勿用于丝质或羊毛衣料：用后须用清水洗手。依据以上材料，回答有关问题。衣物上的蛋渍和奶渍主要成分为　　　　　　 ，洗衣粉中相关作用物质的成分主要为　　　　　　 。此类洗衣粉不能用于丝质或羊毛衣料的洗涤，原因是　　　　　　　　　　　　 。

　 49．(8分)DNA的粗提取与鉴定的实验

　 (1)本实验材料选用鸡血，在取材时每100毫升血液中要加入3克　　　　　　 ，作用是　　　　　　 。在提取DNA过程中并不采用鸡的全血，主要原因是　　　　　　 。

　 (2)图A中加入蒸馏水的目的是　　　　 　　。

　 (3)通过图B所示步骤取得滤液后，再向滤液中加入2mol·L^-1的NaCl溶液的目的是　　　　　　　　　　　　 。

　 (4)图C所示加入蒸馏水的目的是　　　　　　　　　　　　 。

　 (5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可用　　　　　　 试剂进行检验，颜色反应为　　　　　　　　　　　　 色。

　 50．(8分)资料显示，近十年来，PCR技术(DNA聚合酶链式反应技术)成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制(如下图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答：

　 (1)PCR一般要经过30多次循坏，每次循环可以分为变性、复性、延伸三步。其中热至94℃的目的是使DNA样品的　　　　　　 键断裂，这一过程在生物体细胞内是　　 通过　　　　　　 酶的作用来完成的。

　 (2)通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用¹⁵N标记的模板DNA分子(第　 一代)放入试管中，以¹⁴N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第五代时，含¹⁵N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为　　　　　　 。该样品DNA中共含有3000个碱基对，碱基数量满足：(A+T)：(G+C)=1／2，现在要得到1000个拷贝(即与样本相同的DNA)，至少要向试管中加入　　　　　　 个腺嘌呤脱　　 氧核苷酸。

　 (3)由于真核生物中染色体上“遗传因子”基本都是符合孟德尔的遗传规律的，因此人　　 类可以利用PCR技术合成的DNA进行亲子鉴定，其原理是：首先获取被测试者的DNA，并进行PCR扩增，取其中一样本DNA用限制性内切酶切成特定的小片段，放进凝胶内，用电泳推动DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会凝聚在一起，然后利用特别的染料在X光下，便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码。每个人的条码一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲的条码吻合。

①限制性内切酶能将DNA样品切成特定的小片段，这主要体现了酶的　　　　　 。

A．专一性　　 B．高效性　　 C．多样性D．作用条件温和

　 ②双胞胎或多胞胎的“基因身份证明”是否一定完全相同?　　　　　　 ，原因是　　　　　　 。

③右图为某小孩和其母亲以及待测定的四位

男性的DNA指纹图谱示意图，请推测该小孩

真正生物学上的父亲是　　　　　　 。

46．(5分)某一实验小组的同学用酵母菌在含有葡萄糖的培养液中进行培养，测定单位时间内的吸氧量(气体体积)和二氧化碳的发生量(气体体积)。请同答下列有关问题：

　 (1)在酵母菌只进行有氧呼吸时，其吸氧量和二氧化碳的产生量之比是　　　　 。

　 (2)用酵母菌酿酒的开始阶段即充分供氧的情况下，酵母菌大量繁殖的方式是　　 。

　 (3)此时酵母菌若分解360克葡萄糖，则可生成　　　　　　 摩尔的乙醇，写出相关的化学反应式　　　　　　 　　　　　　　　　　　　

　 (4)当这一密闭的培养液中的乙醇达到一定量后，CO₂不再增加的原因可能是　　　　　　　　　　　　 。

　 47．(7分)某实验小组的同学，欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验，实验材料及用具齐全。

　 (1)制备固定化酵母细胞常用　　　　　　 法。

　 (2)制备固定化酵母细胞的过程为：

*使干酵母与　　　　　　 混合并搅拌，使酵母菌活化；

*将无水CaCl₂溶解在蒸馏水中，配成CaCl₂溶液；

*用酒精灯加热配制合适浓度的海藻酸钠溶液；

*海藻酸钠溶液冷却至常温再加入已活化的酵母细胞，

充分搅拌并混合均匀；

*用注射器将A的混合物缓慢滴入氯化钙溶液中。

分析；影响实验成败的关键步骤是　　　　　　　　　　　　 ；

　 (3)该实验小组用如幽所示的装置来进行葡萄糖发酵。(a是固定化酵母，b是反应柱。)

①从上端漏斗中加入反应液的浓度不能过高的原因是：　　　　　　 。

②要想得到较多的酒精，加入反应液后的操作是关闭活塞1和　　　　　　 活塞2。

③为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可以反复利用，实验过程一定要在　　　　　　

条件下进行。

④装置中的曲颈长导管起的作用是　　　　　　　　　　　　 。

45．以下对DNA和血红蛋白的提取与分离(鉴定)实验的分析不正确的是　　　　　 (　　 )

　 　　 A．都要用猪血细胞来做实验

　 　　 B．在DNA的粗提取与鉴定试验中，有两次DNA析出，所用的方法相同

　 　　 C．在实验中都要进行除杂处理以便得到较纯净的DNA或血红蛋白

　 　　 D．将析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后呈现蓝色

第Ⅱ卷(共50分)

44．下列实验中，需对实验材料进行研磨以达到实验目的的有　　　　　　　　　　　　　　　 (　　 )

　　 A．提取洋葱的DNA　　 　　　　　　　　　　　　 B．提取菠菜绿叶中的色素

　　 C．提取牛的血红蛋白　　 　　　　　　　　　　　 D．提取猪肝细胞中的过氧化氢酶

43．在“DNA粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2mL　　 的四种溶液中，经搅拌后过滤，获得4种滤液，含DNA较少的是 (　　 )

　　　 A．滤液E　　 　　　　 B．滤液F　　 　　　　　 C．滤液G　　 　　　　 D．滤液H