研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究，肺部细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图所示，据图回答

1.在基因工程中通常选择细菌质粒作为载体，原因是                          ；如果某质粒由100 0个脱氧核苷酸组成，脱氧核苷酸平均分子量为a,则该质粒的质量为        。

2.图甲中在构建重组载体时，酶切目的基因和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端必须是                。

3.图甲中在将酶切后的目的基因导入到酶切后的质粒上时需要的酶是              ， 图乙中let-7基因转录过程需要的酶是    ，这 两种酶作用的化学键都是          。

4.EcoR I限制酶只能识别序列一GAATTC一，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoR I的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。                      

5.原代培养是是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。原代培养随着培养时间的延长和细胞不断分裂，空间因素和营养因素会限制其进一步生长。此时就需要将培养物分割成小的部分（组织细胞分散开），重新接种到另外的培养器皿内再进行培养，这个过程就称为传代或者再培养。图甲中进行传代培养操作时，需要用　　 　　酶处理贴附在原代培养培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

6.研究发现，let-7基因能影响RAS基因的表达，其影响机理如图乙所示。从分子水平的角度分析，其作用机理是　　                               　    　。

7.下图所示pBR322是目前常用的人工质粒载体。如果将BamHI处理后的pBR322质粒与用BgIⅡ处理得到的目的基因进行重组，并将重组质粒导入原本无amp^R和tet^R  的大肠杆菌进行培养。为了检测重组质粒是否成功导入大肠杆菌，现将上述大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是___       _____ ，图三结果显示，多数大肠杆菌内导入的是___            __。

 

2009年4月底，“甲型H1Nl流感”突然在全世界各个地方出现，法新社称之为“杀手”，路透社称它“前所未有的危险”，美联社称其为“致命的怪病”，世界卫生组织称，猪流感疫情已构成“具有国际影响的公共卫生紧急事态”……。 甲型H1Nl病毒是一种RNA病毒，那么H1Nl中的H和N又是什么意思呢?

原来它们是一些物质的缩写：H是血凝素Hemagglutinin的缩写，而N是神经氨酸酶Neyramidinase的缩写。这两种物质在病毒入侵细胞以及传播过程中，起着极为重要的作用。

    血凝素H是病毒入侵的“开路先锋”，它能和细胞膜上的蛋白结合，在细胞膜上打开一个通道，使得病毒能进入细胞。这样病毒就能在细胞里胡作非为，利用细胞的物质进行自我复制，制造出一群新的病毒。

    当新病毒要钻出宿主细胞的时候，进入细胞的“功臣”H却偏偏还要和宿主的细胞膜“纠缠不清”，这时候就需要依靠神经氨酸酶N来解决问题了。N就像一把刀，通过“水解”的方式切断病毒和宿主细胞膜的最后联系，使病毒脱离寄主细胞，再次去寻找感染下一个目标了。通常用以治疗流感的两种药物“达菲”胶囊和喷雾式药剂“乐感清”（Relenza），其作用原理就是不让这把“刀”起作用，使新的病毒无法脱离宿主细胞，从而抑制病情。

    依据H和N的化学排列的不同，病毒也就有所不同，人们也就在字母后面标出数字来区分它们，其中H有15个类型，N有9个类型。病毒的种类虽然多，但也有高致病性和低致病性之分。在我们已经发现的流感病毒里，原本只有H5和H7是高致病性的，其他则没有那么危险。但这次发现的甲型H1Nl病毒性流感却具有强致病性。

材料分析

（1）．有关病毒的结构，下列说法正确的是（      ）

A．病毒无细胞结构，既不是原核生物，也不是真核生物

B．病毒的衣壳具有保护病毒核酸，决定病毒抗原特异性等功能

C．所有的病毒的核衣壳由蛋白质组成

D．一种病毒只含一种核酸DNA或RNA

（2）． 甲型流感病毒根据其表面蛋白质的不同又可分为H1到H15等15种亚型。下面的陈述中能够高度概括出蛋白质功能的是（     ）

A．细胞和生物体的重要结构物质                  

B．生命活动的主要体现者

C．收缩、运输、免疫等功能活动的物质基础   

D．调节细胞和生物体代谢的重要物质

（3）．蛋白质经消化后的最终产物是（    ）

A．多种氨基酸         B．各种分子量不等的多肽  

C．H₂O、CO₂和尿素    D．以上均不是 

（4）．根据科学观察分析，受到甲型H1Nl病毒的感染后，有的人不表现出明显的症状，却获得了对小儿麻痹症的抵抗力，这种免疫是（    ）

A．非特异性自然免疫             B．非特异性人工免疫

C．特异性自然免疫               D．特异性人工免疫 

（5）．根据现在的研究，没有证据表明禽流感病毒会直接引起人类的流感暴发。但从进化的角度看，人类流感与原先在动物中传播的病毒有关。很可能是在历史上人在驯养猪、鸡的过程中，由于接触，猪流感的某些病株发生了变异，获得对人的致病性。变异形成的原因是        。而甲型H1Nl流感病毒是猪流感、禽流感和人流感三种病毒自然状况下杂合形成的，这种变异形成的原因是       。

（6）． 构成甲型H1Nl流感病毒遗传物质的含氮碱基有那几种？（分别写出名称和英文缩写）。

（7）．之所以称甲型H1Nl流感病毒为生物病毒是因为（   ）

A．它有细胞结构  B．它能繁殖  C．它能新陈代谢  D．它有应激性

（8）．关于甲型H1Nl流感病毒增殖的叙述中，正确的是（     ）

A．病毒侵入宿主细胞后，合成一种蛋白质

B．病毒的繁殖只在宿主的活细胞中进行

C．病毒繁殖时以核衣壳为单位

D．在普通的培养基上能培养病毒

（9）．甲型H1Nl流感病毒必须在活细胞内增殖的原因主要是（   ）

A．无核膜结构    B．无完整酶系   C．对外界抵抗力弱    D．不能产生能量

（10）．除甲型H1Nl流感病毒外，下列四种病原体近几年对人类的影响比较大，其中有细胞结构，但无核膜的是（     ）

A．非典型肺炎病原体          B．疯牛病病原体  

    C．炭疽热病原体               D．口蹄疫病原体

（11）．根据科学研究表明，如果将鸡的抗病毒干扰基因“嫁接”到烟草的DNA分子中可使烟草获得抗病毒的能力，形成基因产品，根据高中生物知识回答下列问题：

(a) 烟草转基因产品的获得属于（  ）

A．基因工程    B．细胞工程      C．发酵工程    D．酶工程

（b）鸡的基因之所以能够嫁接到植物体中去，原因是       。

（c）烟草具有抗病毒能力，说明烟草中产生了       。

（d）不同生物体间基因移植成功，说明生物体共有一套    ，从进化的角度看，这些生物体具有       。

（e）烟草DNA分子嫁接上或切割掉某个基因，实际并不影响遗传信息的表达功能，说明             。

（12）根据血凝素和神经氨酸酶的作用，写出两种制备抗甲型H1Nl流感病毒药物的基本思路。

(a)                 。

（b）                。