6．表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	HnidⅢ	EcoRⅠ	SmaⅠ
识别序列及切割位点

（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有0、2个游离的磷酸基团．
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高．
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割的原因SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因．
（4）与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
（5）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在蔗糖为唯一含碳营养物质的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测．
（6）基因工程中利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶，应选用同种限制酶切割含有目的基因的DNA片段和载体，并用显微注射方法导入受精卵中，再利用SRY探针 （Y染色体上的性别决定基因）进行检测，将检测反应呈阴性（选填“阳”、“阴”）性的胚胎进行移植培养．

5．现在可用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素，请回答相关问题

（1）此基因工程中的目的基因是人胰岛素基因，要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用PCR技术．在培育转基因番茄的过程中所用基因的“剪刀”是限制性核酸内切酶（限制酶），基因的“运载工具”是运载体（质粒）．将人工合成的DNA片段拼接在一起，所需要的酶有DNA连接酶．
（2）将重组质粒放入番茄植株的受体细胞中常用的方法是农杆菌转化法．
（3）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种．下图是获取植酸酶基因的流程．
据图回答：
①图中基因组文库大于（小于/等于/大于）cDNA文库．
②B过程需要的酶是逆转录酶；A、C过程中可以（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株．

4．一对表现型正常的夫妇，他们的双亲中都有一个白化病患者，预计他们生一个白化病男孩（　　）

A．

$\frac{1}{44}$

B．

$\frac{1}{8}$

C．

$\frac{3}{8}$

D．

$\frac{1}{4}$

3．图甲表示某细菌的质粒中相关限制酶的切割位点，图乙表示目的基因所在的DNA中相关限制酶的切割位点．请分析并回答下列问题：

（1）用Sma l限制酶处理图甲所示的质粒会得到2个DNA片段，用AluⅠ处理图乙所示的外源DNA会增加2个游离的磷酸基团．
（2）为了避免目的基因和质粒在酶切后产生的片段发生自身环化或任意连接，以及便于筛选需要，在实际操作中，一般应选用PstI和HindⅢ（填限制酶名称）同时酶切质粒和含目的基因的外源DNA．再用DNA连接酶处理．如果是用PCR技术扩增目的基因，设计引物是关键，但在扩增时退火温度一般为55℃一60℃，对于（A+T）%＞50%，一般用55℃；（A+T）%≤50%时一般用60℃，原因是G与C（之间是三个氢键）比例越高越稳定[或A与T（之间是二个氢键）比例越高越不稳定]．
（3）为了筛选获得含有重组质粒的大肠杆菌，实验人员首先将经转化处理过的大肠杆菌接种在含四环素（抗生素）的培养基中，然后用影印法将该培养基上的菌落按原来的方向印在含氯霉素（抗生素）培养基上，以筛选获得含重组质粒的细菌．在含四环素培养基中能生长繁殖，而在含氯霉素培养基中不能生长繁殖的是导人了重组质粒（或目的基因）的大肠杆菌．

（4）经检测：在上述导入了重组质粒的大肠杆菌菌株中，目的基因正常转录形成了mRNA，但其所控制合成的蛋白质却并不具有生物活性，最可能的原因是大肠杆菌细胞内缺乏内质网与高尔基体（或大肠杆菌缺乏生物膜系统），不能对多肽链进行加工（折叠、组装与修饰）．

2．科学家仅使用小分子化合物的组合对体细胞进行处理，成功地将已高度分化的小鼠成纤维上皮细胞诱导成多潜能干细胞，并将其命名为化学诱导的多潜能干细胞（GiPS细胞）．图是利用GiPS细胞对镰刀形细胞贫血症小鼠进行基因治疗的技术流程：

请据图回答：
（1）过程①中，在培养液中加入胰蛋白酶使上皮组织细胞彼此分散，若用传代培养的细胞应不超过10代，以保证细胞的正常的二倍体核型（遗传物质）不发生变化．
（2）科学家用小分子化合物的组合对小鼠成纤维上皮细胞进行处理，促使已经（高度）分化的成纤维细胞“重新编程”产生GiPS细胞，这些GiPS细胞与囊胚中的内细胞团细胞性质相同．
（3）过程③中，导入的重组质粒中调控目的基因表达的组件是启动子和终止子，标记基因的作用是鉴别和筛选含有目的基因的受体细胞．
（4）若利用GiPS细胞诱导分化形成早期胚胎（桑椹胚、囊胚），再经胚胎移植技术，可较容易得到高等动物的体细胞克隆个体．
（5）GiPS细胞经体外诱导分化，可以直接培育出人造组织器官．图中培育骨髓造血干细胞移植回该小鼠体内与异体骨髓造血干细胞移植相比，最大的优点是不出现免疫排斥反应．

1．质粒能成功转入植物细胞，并将质粒上的一部分外源DNA整合到植物的DNA中．如图表示利用质粒进行转化获得抗除草剂大豆的过程．请据图分析回答：

（1）过程②将目的基因导入质粒后，需要借助DNA连接酶使质粒与目的基因的切口黏合．
（2）过程③没有（有/没有）进行碱基互补配对．
（3）目的基因在大豆细胞中的表达包括转录和翻译两个过程．
（4）过程④得到试管苗的关键步骤是利用含有一定营养和植物激素的培养基诱导植物细胞进行脱分化和再分化．
（5）为了检测通过④过程获得的幼苗是否具有抗除草剂的特性，可采用的方法是对该幼苗喷施除草剂，观察其生长情况．

20．下列有关基因工程操作的叙述中，错误的是（　　）

	A．	用同种限制酶切割载体和目的基因可获得相同的黏性末端
	B．	PCR技术利用的Taq酶属于DNA聚合酶
	C．	检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程已操作成功
	D．	用标记的目的基因作探针可检测目的基因是否转录出了mRNA

19．下列关于构建基因表达载体的相关叙述中，错误的是（　　）

	A．	需用限制性核酸内切酶和DNA连接酶
	B．	必须在细胞内进行
	C．	终止子是一段有特殊结构的DNA片段
	D．	启动子位于目的基因的首端

18．下列有关人体调节水平衡的相关叙述中，错误的是（　　）

	A．	抗利尿激素通过血液运输后作用于肾小管和集合管细胞
	B．	人体摄取食物过咸，渴觉中枢和水平衡调节中枢均产生兴奋
	C．	人体剧烈运动导致大量出汗，此时下丘脑合成并释放抗利尿激素
	D．	人体从30℃环境进入0℃环境中，抗利尿激素分泌减少，尿量增加

17．如图为现代版“桑基鱼塘”农业生态系统的能量流动和物质循环模式图，据图分析回答下列问题：

水深（米） 个体数量	物种甲	物种乙	物种丙
0.5	100	50	10
0.7	120	60	15
0.9	200	70	20
1.1	120	80	25
1.3	100	90	30
1.5	0	100	35
1.7	0	90	40
1.9	0	80	35
2.1	0	0	20
2.3	0	0	0

（1）图中“?→桑”表示植物（桑）光合作用固定太阳能．
（2）模式图中“?→池塘”的箭头是否正确？正确．理由是这一箭头表示池塘中的植物光合作用固定的太阳能．
（3）如图中所示，鱼A在此农业生态系统中的成分是分解者．
（4）生态农业比单一农业经济效益高，从能量流动的角度来看，是因为生态农业实现了能量的多级利用，提高了能量的利用率．
（5）在生态农场中，把蚕的排泄物经处理后作为农作物肥料，可以减少化肥的使用，使农作物增产，请从光合原理解释农作物增产的原因，蚕排泄物中的有机物被土壤中微生物分解，产生二氧化碳（和无机盐）促进植物的光合作用．
（6）调查发现，该池塘内存在一条由甲、乙、丙三种生物构成的捕食食物链（以生产者为起点），甲、乙、丙在池塘中不同深度的分布状况如上表所示．其中最可能是生产者的是甲．
（7）甲、乙、丙在生态学上是否可以构成一个生物群落？否．原因是甲乙丙中缺少微生物（分解者）．